富硒大米中硒的含量测定（大米富硒标准检测）

＋食品科技～“●ｒＦＤＯＤＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧｙ７妒、、？誊彗■目品安全与趋测氢化物发生一原子荧光光谱法测定富硒发芽糙米中的硒含量尹礼国１３。蒲云峰２，钟耕梦（１．宜宾学院西南特色经济植物保护与利用重点实验室，宜宾６４４００７；２．新疆塔里木大学，塔里木８４３３００；３．西南大学食品科学学院，重庆４００７１６）摘要：对氢化物发生一原子荧光光谱法（ＨＧ—ＡＦＳ）ｍ＇Ｉ定富硒发芽糙米硒含量的方法。研究表明：其检出限为０．２斗ｇ／Ｌ，相对标准偏差ＲＳＤ为０．９４％，平均回收率为９９．７４％，精密度高、稳定性好、简便快速，适合于富硒发芽糙米中硒的定量分析。通过测定采用不同浓度亚硒酸钠溶液富硒处理的发芽糙米的总硒、有机硒和无机硒含量，确定选择硒浓度为５０ｍｇ／Ｌ的溶液富硒处理后的发芽糙米品质较好。关键词：富硒发芽糙米；硒；氢化物发生一原子荧光光谱法中图分类号：ＴＳ２０７．３文献标志码：Ａ文章编号：１００５—９９８９（２００８）０５－０２０７－０３Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｓｅｌｅｎｉｕｍｃｏｎｔｅｎｔｉｎｓｅｌｅｎｉｕｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｒｉｃｅｂｙｈｙｄｒｉｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｔｏｍｉｃｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＭ叭Ｌｉ－ｇｕｏＬ３，ＰＵＹｕｎ－ｆｅｎｇ。

２，ＺＨＯＮＧＧｅｎ矿（１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＳｏｕｔｈｗｅｓｔＣｈｉｎｅｓｅＳｐｅｃｉａｌＥｃｏｎｏｍｉｃＰｌａｎｔ，Ｙｉｂｉｎ６４４００７；２．ＴａｒｉｍＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｔａｒｉｍ８４３３００；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４００７１６）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ａｍｅｔｈｏｄｈａｓｂｅｅｎｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍｉｎｓｅｌｅｎｉｕｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｒｉｃｅｂｙｈｙｄｒｉｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｔｏｍｉｃｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＨＧ－ＡＦＳ）．Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔ，ＲＳＤａｎｄａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｉｏｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅ０．２ｐｇ／Ｌ，０．９４％，９９．７４％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗｈｉｃｈｉｓａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｔｅａｄｙａｎｄｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ，ｗａｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍｉｎｓｅｌｅｎｉｕｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｒｉｃｅ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｓｅｌｅｎｉｕｍ．ｏｒｇａｎｉｃｓｅｌｅｎｉｕｍａｎｄｉｎｏｒｇａｎｉｃｓｅｌｅｎｉｕｍｏｆｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｒｉｃｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ，ｗｈｉｃｈｗａｓｔｒｅａｔｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｔｅｎｔｏｆＮａ２ｓｅ０９ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｉｔｗａｓｐｒｏｖｅｄｔｈａｔｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｄｃｅｗａｓｂｅｔｔｅｒｔｈａｎｏｔｈｅｒｓ．ｔｒｅａｔｅｄｂｙｔｈｅｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆ５０ｍｇ／Ｌｓｅｌｅｎｉｕｍ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｅｌｅｎｉｕｍ．．ｅｎｄｃｈｅｄｓｐｒｏｕｔｅｄｂｒｏｗｎｒｉｃｅ；Ｓｅｌｅｎｉｕｍ；ＨＧ．．ＡＦＳ硒是人体必需的微量元素，是人体红细胞谷胱甘肽过氧化物酶的重要组成成分，其主要作用是参与酶的合成，保护细胞膜的结构与功能免遭过度氧化与干扰，具有抗氧化、提高机体免疫力、抗癌、清除自由基、延缓衰老、预防多种地方性流行病、可与体内的Ｈ卧Ｃｄ、Ａｓ、Ｔｅ、Ｐｂ等有害金属形成金属硒蛋白复合物而解毒，并将金属排出体外，从而保护肝脏，降低对人体的毒性等多种功能㈣。

目前，硒的测定方法主要有感应耦合等离子体质谱分析法（ＩＣＰ—ＭＳ）ｒ¨、分光光度法［４１、２３一二氨基萘（２，３一ｄｉａｍｉｎｏ—ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅ，ＤＡＮ）荧光法、石墨炉原子吸收法嘲、高效液相色谱法［６１、中子活化法ｔ７１、氢化物发生原子吸收光谱法［８１、氢化物发生原子荧光光谱法ｆＨｙｄｒｉｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎａｔｏｍｉｃｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙＨＧ－ＡＲ妒揭。收疆日期：２００７—１０－１６・通讯作者作者简介：尹礼国（１９７９＿＿），男，湖北大冶人，硕士，讲师．主要从事食品生物技术与安全检测研究的工作。目品安坌与施测■其中，ＨＧ－ＡＦＳ分析法广泛用于可形成挥发性氢化物元素的测定，是一种新的灵敏度高、干扰小、快速、准确的痕量分析技术。本文采用ＨＧ—ＡＦＳ方法，测定了经不同浓度的亚硒酸钠溶液富硒处理后的发芽糙米中总硒、有机硒和无机硒含量，对富硒效果进行了科学地评价。１实验试剂与仪器１．１实验材料Ｑ优杂交水稻：重庆市铜梁龙米业有限责任公司，为当年收获水稻。经砻谷，剔除不完善粒，得供试原料。１．２实验试剂硝酸、高氯酸、盐酸、氢氧化钠：优级纯；硼氢化钾、铁氰化钾、亚硒酸钠：ＡＲ。

１．３实验仪器ＡＦＳ一８２０双道原子荧光分光光度计：北京吉天仪器有限公司；高性能ｓｅ空心阴极灯：北京有色金属研究总院；ＨＨ—Ｓ恒温数显水浴锅：巩义市英峪予华仪器厂。２实验方法２．１富硒发芽糙米的制备工艺将糙米经除杂、筛选后用自来水洗去其表面灰尘，然后采用不同浓度的亚硒酸钠溶液浸泡至糙米吸水胀润后取出，放入垫有２层滤纸的磁盘上，在３５℃恒温箱中发芽至芽长约ｌｍｍ后取出，用８０℃的热水灭酶处理１０ｍｉｎ后沥干水，在４５℃的电热恒温箱中干燥至含水率１５％以下，即得富硒发芽糙米。２．２样品处理２．２．１总硒测定的样品处理准确称取１．００００ｇ样品。装入２５０ｍＬ磨口烧瓶，依次加人浓硝酸１２ｍＬ、高氯酸６ｍＬ、过氧化氢ｆ３０％）６ｍＬ，振荡后，静置冷消化过夜。第２天，将烧瓶置于电炉上，先小火加热，等消化液变透明时，加大火力，待产生大量白烟时，停止加热，冷却，加５％的盐酸溶液５ｍＬ，加１００ｇ几铁氰化钾２ｍＬ，用５％的盐酸定容５０ｍＬ，待测。２．２．２无机硒测定的样品处理准确称取１．００００ｇ样品，装入１００ｍＬ烧杯，加入２０ｍＬ蒸馏水，搅拌均匀，常温静置１ｈ，过滤，滤液于８０℃水浴恒温１ｈ，过滤，加１００异，Ｌ铁氰化钾２ｍＬ，用５％的盐酸定容５０ｍＬ，待测。

２．３仪器工作参数氩气流速：载气４００ｍＬ／ｍｉｎ，屏蔽气１０００ｍ１７ｍｉｎ；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；读数时间：１０．０ｓ；读数延迟时间：１．０ｓ；空心阴极灯电流：８０ｍＡ；负高压：３００Ｖ；原子化器：炉度：一一矧。熊薰黻纶乡乡。８ｍｍ；温度：２００℃；载流：５％盐酸；还原剂：ｌＯｓ／Ｌ硼氢化钾溶液。２．４标准曲线准确称取亚硒酸钠０．２１９０ｇ，用去离子水定容至１００ｍＬ，即ｌｍｇ／ｍＬ的硒标准储备液。使用时，用５％盐酸溶液配制系列为０、１．０、２．０、４．０、１０．０、２０．０、４０．０、８０．０斗ｇ几的溶液。待炉温升至所需温度并稳定０．５ｈ后进样测定。采用原子荧光光谱法测得硒含量标准曲线回归方程：Ｙ：１５．９７６Ｘ＋２２．５４５。该曲线的回归系数为Ｒ：＝０．９９９４，交替测定空白和标准液，计算得出该方法的检测限为０．２斗ｇ，Ｌ，标准曲线见图１。１４００１２００１００警鲫８００４００２０００硒浓度，（圳图１原子荧光光谱法测硒的标准曲线２．５精密度与稳定性实验取５０ｍｓ／Ｌ硒处理的Ｑ优发芽糙米１．００００ｇ，按照方法２．２．１进行样品处理，重复测定硒含量（ｎ：５１，然后统计分析。

２．６加标回收率实验分别取５份５０ｍｇＬ硒处理的Ｑ优发芽糙米１．００００ｇ，按照方法２．２．１进行样品处理，在定容时分别加入相当于０．５０００、１．０１３（０、１．５０００、２．００００、２．５０００斗ｇ硒的标准溶液，然后定容，测定并统计分析。３结果与讨论３．１精密度与稳定性实验结果按照２．３的仪器工作参数开展精密度实验，结果如表ｌ所示。表１精密度实验结果（ｎ＝５）采用ｔ检验法（Ｐ＝９５％）得，该方法测得硒含量的置信区间为（２．６３３４±０．０３０７）ｍｅＣｇ，ＲＳＤ为０．９４％，其检验结果在Ｐ＞０．０５时，测定值之间无显著性差异。因此，本文采用的方法测定富硒发芽糙米中的硒含量，相对标准偏差较小，结果重现性好、精密度高、稳定性好。３．２加标回收率实验结果。食ｉＦ品ＯＯＤ曩燃Ｅ Ｉ＂ＥＣＨＮＯＬＯＧ两，——－目品安呈与趋潮”ｓｃＪ￡～ｃ＾～Ｄｙ％≈一＿胃—Ｅ廿年兰●■面：哪““、、二：鼍≥０≥按照２．３的仪器工作参数，根据方法２．６对样品的回收率进行测定，结果见表２。表２加样回收率测定结果由表２可知，本方法的平均回收率为９９．７４％，表明原子荧光光谱法适合于测定富硒发芽糙米中硒的定量分析。

３．３样品中总硒及无机硒测定结果采用ＨＧ－ＡＦＳ方法，在方法２．３工作条件下测得由不同硒浓度的亚硒酸钠溶液处理后的富硒发芽糙米的总硒、有机硒、无机硒含量如图２所示。样品序号图２经不同浓度亚硒酸钠浸泡处理后的发芽糙米中的总硒、有机硒和无机硒含量由图２可知，经过硒溶液浸泡发芽后的糙米能显著提高其总硒和有机硒含量，总硒能提高４３．３７倍，有机硒能提高４０．０４倍。在硒浓度为１０～５０ｍｒｄＬ时，随着硒浓度的增加，发芽糙米中总硒、有机硒和无机硒含量增加。在浸泡液硒浓度为５０ｍｒｄＬ时，有机硒含量达到最大，当浸泡硒浓度超过５０ｍｒｄＬ时，发芽糙米的总硒含量增加变得缓慢，有机硒含量随着硒浓度的增大而降低。在硒浓度变化的过程中，发芽糙米的无机硒含量随着硒浓度增加而逐渐增加，当浓度超过５０ｍｒｄＬ时，发芽糙米的无机硒含量增加十分明显。硒的生物作用与其分子结构有关，有机硒较无机硒利用率高、毒性小，硒的有机化是一种安全有效的补硒途径㈣ｑ。综合考察经济性与硒转化率，糙米富硒发芽应选择硒浓度为５０ｍｇ／Ｌ的亚硒酸钠溶液处理。４结论通过研究表明，在确定的仪器工作参数下，氢化物发生一原子荧光光谱法测定硒含量的检出限为０．２ｐｇ／Ｌ，相对标准偏差ＲＳＤ为０．９４％，平均回收率为９９．７４％，标准曲线回归相关系数Ｒ２＿－０．９９９４，精密度高、稳定性好，加样回收率好，适合于富硒发芽糙米中硒的定量分析。

对采用不同浓度亚硒酸钠溶液富硒发芽糙米的总硒、有机硒和无机硒含量测定表明，经富硒处理后，发芽糙米中总硒、有机硒、无机硒含量显著增加。综合考察总硒、有机硒含量及无机硒转化率，确定富硒发芽糙米选择硒浓度为５０ｍｇ／Ｌ的亚硒酸钠溶液处理较好。参考文献：［１】ＵＴｉｎｇｇｉ，ＴＧｉａｎｄｕｚｚｏ，ＲＦｒａｎｃｉｓ，ｅｔａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍｉｎｒｅｄｂｌｏｏｄｃｅｌｌｓｂｙｉｎｄｕｃｔｉｖｅｌｙｃｏｕｐｌｅｄｐｌａｓｍａｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＩＣＰ－ＭＳ）ａｆｔｅｒｍｉｃｒｏｗａｖｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎ阴．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＲａｄｉｏａｎａｌｙｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４，２５９（３）：４６９－－４７２【２】李丽辉，林亲录．食品中硒的生理功能及其检测方法．食品工程，２００７。（１）：２８－２９【３】王娟，陈晓雪，刘德兵，等．硒的生物学功效及富硒果品研究进展．华南热带农业大学学报，２００７。１３（１）：１７—２１【４】金松子，蔡振华，蒋庆峰．分光光度法测定富硒蛋粉中的硒含量［Ｊ１．现代食品与药品杂志。２００７．１７（１）：３７—３９【５】铁梅，张崴，李晶，等．石墨炉原子吸收法测定食用茵中硒叨．光谱学与光谱分析，２００６，２６（１）：１５１—１５３［６］中国环境监测总站．土壤元素的近代分析方法．北京：中国环境科学出版社．１９９２：７４【７】陈春英，赵九江，章佩群，等．中子活化法研究硒在人体组织中的亚细胞分布忉．核化学与放射化学，２００２，２４（３）：１３８—１４３ｆ８１龚治汀，麻映文．微型氢化物发生原子吸收光谱法测定砂