纳米硒产品的开发利用（纳米硒骗局）

本发明专利技术属于纳米硒制备技术领域，公开了一种功能化纳米硒及其制备方法和在制备抑菌、杀菌药物中的应用。该功能化纳米硒为槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒中的至少一种。本发明专利技术的功能化纳米硒，其不仅具有杀死细菌及多药耐药细菌的活性，而且具有抑制细菌及多药耐药细菌生长的生物活性，适用于制备抑制细菌及多药耐药细菌生长和杀菌药物。本发明专利技术功能化纳米硒的制备方法简单，通过原位还原修饰得到，可直接保存和使用。本发明专利技术的功能化纳米硒通过多种功能修饰，提高了其靶向性以及在细菌细胞膜中的转运和跨膜吸收，能够增加细菌的药物摄取量，减少外排，从而保证细菌细胞内药物维持在较高水平。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于纳米硒制备

，特别涉及一种功能化纳米硒及其制备方法和在制备抑菌、杀菌药物中的应用。

技术介绍

细菌感染的治疗是在生物医学领域中最具挑战性的任务之一。抗生素被开发利用超过70年，一直以来都被认为是最有效的用来治疗细菌感染类型的药物。然而，滥用抗生素会导致越来越多的多重耐药性的细菌。目前，多重耐药性超级细菌在全球范围内以前所未有的速度出现，并导致公共健康威胁，包括革兰氏阳性耐万古霉素肠球菌(VRE)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和革兰氏阴性多药耐药(MDR)肺炎克雷伯菌，鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌属，简称为“ESKAPE”。据报道，靶向细胞膜的药物可有效地治疗超级细菌，如阳离子、两亲性聚碳酸酯纳米粒子、周质蛋白的蛋白水解剂、肽聚糖识别蛋白、ATP酶抑制剂等。近年来，抗菌材料得到了广泛的关注和高度重视，抗菌材料，指自身具有杀死或抑制微生物功能的一类新型材料。抗菌剂是某些细菌、霉菌等微生物高度敏感的化学成分，极少量的抗菌剂添加到普通材料中，即可制成抗菌材料。一般抗菌剂分为三类：天然类、有机类、无机类。天然类抗菌剂作用寿命短、耐热性差，应用范围受到限制。有机类抗菌剂毒性较大，较难分解，容易造成二次污染。无机类抗菌剂克服了以上两类抗菌剂的缺点，且不易产生耐药性，目前受到广泛的关注。纳米药物作为抗菌药物输运载体，由于其缓释作用从而延长药物作用时间，可达到靶向输送药物的目的，进而增强药物效应，减轻不良反应，提高药物稳定性，纳米药物还可采取一些新的给药途径等，因而在医药领域得到广泛应用。硒具有提高人体免疫力、抗氧化、延缓衰老和防癌、抗癌的作用，功能化纳米硒在生物活性方面具有更多的应用。氯化乙酰胆碱是一种非抗生素胺类化合物，具有靶向细胞膜的作用。至今未发现有本专利技术的功能化纳米硒用于制备抑菌、杀菌药物的报道。

技术实现思路

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本专利技术的首要目的在于提供一种功能化纳米硒。本专利技术的另一目的在于提供一种上述功能化纳米硒的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供上述功能化纳米硒在制备抑菌、杀菌药物中的应用。本专利技术的目的通过下述方案实现：一种功能化纳米硒，优选为槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒中的至少一种。所述槲皮素的分子式为C15H10O7；所述氯化乙酰胆碱的分子式为C7H16NO2·Cl。所述的槲皮素修饰的纳米硒，优选通过如下方法制备得到：将槲皮素甲醇溶液滴加至含硒溶液中，再加入硼氢化钠(NaBH4)溶液，搅拌，得到槲皮素修饰的纳米硒。所述的氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，优选通过如下方法制备得到：将氯化乙酰胆碱水溶液滴加到含硒溶液中，滴加冰醋酸，冰水浴搅拌，再加入硼氢化钠溶液，搅拌，得到氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。所述的槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，优选通过如下方法制备得到：将槲皮素甲醇溶液、氯化乙酰胆碱水溶液滴加到含硒溶液中，滴加冰醋酸，冰水浴搅拌，再加入硼氢化钠溶液，搅拌，得到槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。槲皮素修饰的纳米硒制备方法中，所用槲皮素与含硒溶液中硒元素的摩尔比优选为2:1～4:1。

氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒制备方法中，所用氯化乙酰胆碱与含硒溶液中硒元素的摩尔比优选为4:1～6:1。槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒制备方法中，所用槲皮素、氯化乙酰胆碱与含硒溶液中硒元素的摩尔比优选为(1～2):(1～2):1。上述三种功能化纳米硒制备方法中，所述的含硒溶液优选为亚硒酸钠溶液或二氧化硒溶液。上述三种功能化纳米硒制备方法中，所述含硒溶液的浓度优选为0.5～10mMol/L。上述功能化纳米硒制备方法中，所述的槲皮素甲醇溶液的浓度优选为0.5～10mMol/L，通过把槲皮素溶解于无水甲醇中制备得到。所用的甲醇优选为分析纯。上述功能化纳米硒制备方法中，所述氯化乙酰胆碱水溶液的浓度优选为0.5～10mMol/L。上述三种功能化纳米硒制备方法中，所述硼氢化钠(NaBH4)溶液的浓度优选为0.1～10mMol/L。上述三种功能化纳米硒制备方法中，所用硼氢化钠与含硒溶液中硒元素的摩尔比优选为0.1:1～1:1。本专利技术添加冰醋酸用于提供弱酸性环境，优选滴加几滴即可，可通过确定反应体系的酸碱性确定。上述制备方法中所述的搅拌优选为缓慢搅拌，时间优选为0.5h，或通过观察体系颜色变色确定。

所述冰水浴搅拌指体系放置于冰水浴中搅拌均匀即可，优选搅拌10min。上述三种功能化纳米硒制备方法中，搅拌后优选将体系在冷却降温条件下静置，更优选为在4℃下放置12h使反应完全。静置后可通过离心或过滤等方式进行分离，得到产物。所述分离得到的产物优选使用PBS缓冲液洗涤并于70℃干燥2天。上述本专利技术的功能化纳米硒可应用于制备抑菌、杀菌药物中，其中功能化纳米硒为活性成分，具有抑菌、杀菌活性。上述制备得到的槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒均具有优异的抑制细菌及多药耐药细菌生长和杀菌的生物活性，可应用于制备抑菌、杀菌药物中。本专利技术相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：(1)本专利技术提供了一种功能化纳米硒，其不仅具有杀死细菌及多药耐药细菌的活性，而且具有抑制细菌及多药耐药细菌生长的生物活性，适用于制备抑制细菌及多药耐药细菌生长药物和杀菌药物。(2)本专利技术制备的槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒或槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，直接以槲皮素或氯化乙酰胆碱与单质纳米硒耦合，原位还原修饰，制备过程产物体系简单，产品可直接保存和使用。

(3)本专利技术采用的修饰剂提高了功能化纳米硒的靶向性以及在细菌细胞膜中的转运和跨膜吸收，能够增加细菌的药物摄取量，减少外排，从而保证细菌细胞内药物维持在较高水平。附图说明图1是实施例1的槲皮素修饰的纳米硒的透视电镜(TEM)图。图2是实施例3的氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒的透视电镜(TEM)图。图3是实施例5的槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒的透视电镜(TEM)图。图4是功能化纳米硒体外对细菌细胞膜的破坏作用曲线图。图5是功能化纳米硒对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果图。图6是功能化纳米硒对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的作用效果(SEM)图。具体实施方式下面结合

【技术保护点】

一种功能化纳米硒，其特征在于为槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素‑氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒中的至少一种。

【技术特征摘要】

1.一种功能化纳米硒，其特征在于为槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆

碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的功能化纳米硒，其特征在于：

所述的槲皮素修饰的纳米硒，通过如下方法制备得到：

将槲皮素甲醇溶液滴加至含硒溶液中，再加入硼氢化钠溶液，搅拌，得到

槲皮素修饰的纳米硒；

所述的氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，通过如下方法制备得到：

将氯化乙酰胆碱水溶液滴加到含硒溶液中，滴加冰醋酸，冰水浴搅拌，再

加入硼氢化钠溶液，搅拌，得到氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；

所述的槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，通过如下方法制备得到：

将槲皮素甲醇溶液、氯化乙酰胆碱水溶液滴加到含硒溶液中，滴加冰醋酸，

冰水浴搅拌，再加入硼氢化钠溶液，搅拌，得到槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的

纳米硒。

3.根据权利要求2所述的功能化纳米硒，其特征在于：槲皮素修饰的纳

米硒制备方法中，所用槲皮素与含硒溶液中硒元素的摩尔比为2:1～4:1；氯化

乙酰胆碱修饰的纳米硒制备方法中，所用氯化乙酰胆碱与含硒溶液中硒元素的