大米里添加富硒酵母粉（富硒酵母粉冲服）

1、硒的形态分析方法阶段性总结报告由于不同形态硒化合物的功效及其毒性各不同，因此准确地定性定量分析食品中不同形态和价态的硒对保障人体安全及健康具有重要意义。食品中 微量元素的形态分析不能停留在静态检测，而应该将该技术应用到如何提高微量元素的生物有效性和开发功能食品的研究上。1硒的形态分析研究现状表1是对近年来有关学者在硒的形态检测上常用的技术方法进行了介绍。表1硒形态分析实例检测对象检出硒形态种类提取溶剂和方法分离方法分离参数测定方法引用竹笋亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）；硒代 蛋氨酸（SeMet）；硒代胱氨酸（SeCys2）；甲基 硒代半胱氨酸（MeSeCys）；硒代乙硫氨酸（SeEt

2、）（6种）链酶蛋白酶E 超声波提取液相色谱法（LC）Hamilton PRP-X100；5 mmol/L 柠檬酸(pH 4.72) 作为流动相电感耦合等 离子体质谱 法（ICP-MS）吴雅颖 等人富硒食品亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）；硒代 蛋氨酸（SeMet）；硒代胱氨酸（SeCys2）；硒脲 （SeUr）；硒代乙硫氨酸（SeEt）（6种）0.1 mol/L HCl超声波提取液相色谱发（LC）Hamilton PRP-X100；20 mmol/L 柠檬酸(pH 6.0) 作为流动相电感耦合等 离子体质谱 法（ICP-MS）王欣等 人扇贝、海参、鱼亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（

3、W）；硒代 蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸（SeCys2）（4 种）2去离子水 超声波提取液相色谱法（LC）Hamilton PRP-X100；40 mmol/L(NH4)2HPO4 (pH 6.0)作为流动相原子火光光 谱法（AFS）尚德荣 等人蓝莓亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）（2种）交联壳聚糖（脱 乙酰度为92% ） 固相萃取可实现分离，但吸收速率根 据PH值变化原子吸收光谱（AAS）孟昭荣 等人大蒜油二甲基硒（DMSe）；二甲基二硒（DMDSe）（2种）气相色谱法（GC）SE-54毛细管色谱柱； 起始温度40C,lmin后以 15C/min 程序原子吸收光谱（AAS）白文

4、敏 等人升温至所需温度，汽化室温 度 20C奶粉亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）；硒代 蛋氨酸（SeMet）；硒代胱氨酸（SeCys2）（4 种）2乙酸沉淀蛋白，流动相提取离子色谱（IC）Hamilton PRP-X100；5 mmol/L 柠檬酸、10 mmol/L 乙酸铵、0.1%三氟乙酸（pH 5.2）作为流动相电感耦合等 离子体质谱 法（ICP-MS）林立等 人新鲜的蘑菇和猪肉亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）；硒代 蛋氨酸（SeMet）；硒代胱氨酸（SeCys2）；硒 代乙硫氨酸（SeEt）（5种）Se（W）、Se（W）、Se Met用稀酸提 取；SeCys2 和SeE

5、t用酶水解提 取液相色谱法（LC）Hamilton PRP-X100；5 mmol/L 柠檬酸（pH 4.5） 作为流动相电感耦合等 离子体质谱 法（ICP-MS）土内涛 等人牛奶游离的硒代蛋氨酸（free SeMet）（1种）乙月青涡流萃取液相色谱法（LC）Acquity UPLC BEH 七 色谱 柱；以水：乙青：甲酸 （95：5：0.1，V / V）为流 动相超高效液相色谱一串联质谱法（UPLC-MS/MS）何梦洁 等人目前，硒的形态分析应用最广泛的提取方法是超声提取法，常用的分离方法是液相色谱法（LC），应用较多的检测方法是电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）。2硒的形态分析现象2.

6、1硒的形态分析方法研究（1）不同单酶对花生中硒形态的影响到目前为止，我们尝试了五种单酶用于研究硒形态的试验，分别为：中性蛋白酶、蛋白酶K、胰蛋白酶、链霉蛋白酶、脂肪酶。本试验以富硒花生为 研究对象。试验结果如下：五种单酶一钢代胱氨酸晒代蛋氨酸（SeMet）T-丑晒酸盐（硒酸盐”心F图1不同单酶对花生中硒形态的单酶名称-尤点缺点中性蛋白酶能提取出硒代胱氨酸 和硒代蛋氨酸，且提 取率较高没有提取出亚硒酸盐和硒 酸盐蛋白酶K能提取出硒代胱氨酸 和硒-弋蛋氨馥提取率较低，没有提取出 亚硒馥盐和硒酸盐胰蛋白酶能提取出硒代胱氨酸 和硒-弋蛋氨馥提取率较低，没有提取出 亚硒馥盐和硒酸盐链霉蛋白酶能提取出4种

7、硒形态： 硒代胱氨酸、硒代蛋 氨酸、亚硒酸盐和硒 酸盐,且提取率是五 种酶中最11的。不能确定该酶会不会影响 硒形态之间的转化，使测 出的硒的形态含量增加.脂肪酶能提取出硒代蛋氨酸提取率是五种单酶中最小 的，不能提取出硒代胱氨 馥、亚硒酸盐和硒酸盐表2不同单嗨作为提取剂的优缺点总体而言，链霉蛋白酶的提取效果最好，所提取出的四种硒形态的含量均最高。提取效果排列顺序为链霉蛋白酶中性蛋白酶胰蛋白酶蛋白酶k脂 肪酶。（2）不同酶提取时间对大米中硒形态的影响酶提取时间对硒形态的提取效果有至关重要的影响，若提取时间过短，提取不充分，测量结果偏低；若提取时间过长，浪费时间、精力 和财力，还可能会提取出更多的

8、杂质，硒形态之间也可能发生转化。本研究设置的酶提取时间分别为4 h、8 h、12 h、16 h、20 h、24 h，研 究对象为富硒大米。试验结果如下：-钢代胱氨酸晒代蛋氨酸（SeMet）丑晒酸盐（派IV）一硒酸盐”心F表3不同酶提取时间对大米硒形态提暇率的锻响酶提取时间（h）提取率424.7S50.61258. 91674. 42079.124119. 1图2不同酶提取时间对大米中硒形态的影响由图2和表可知，硒形态的提取率随着提取时间的增加而增大，提取时间为24h时，大米的硒形态提取率达到最大值，为119.1%。易知知24 h时， 硒形态之和大于总硒含量，导致这一现象的可能原因如下：一是24

9、 h的提取时间过长，导致有杂质产生；二是测形态用的离心管未清洗干净，残留有硒; 三是测定总硒时，消解不彻底，导致总硒含量偏低。提取时间为20 h时，硒形态提取率为79.1%，仍有上升空间，因此最适酶提取时间应选在20 h到 24 h之间。（3）中性蛋白酶的不同用量对富硒大米和富硒酵母中硒的形态的影响中性蛋白酶不同用量对富硒大米中硒形态的影响不同硒含量的样品，其酶的添加量不同。本组试验选用硒含量低的样品（总硒含量10 mg/kg）富硒大米作为研究对象，研究添加不同的酶量，对富 硒大米中硒形态的影响，添加的酶量分别为5 mg、10 mg、20 mg、50 mg、80 mg、100 mg。试验结果如

10、下：表4中性蛋白酶的不同用量对大米酒形态的影响一硒代耽氨酸(SeCy52 ) T增代蛋氨酸 SeMet)酶的用量(吧)提取率(V534.91049. 520&8. 85030.480125.0100130.5Q& 10 20 BO 10 50 60 70 ED 90 LOO L1C酶的用里(mg)图3中性蛋白酶不同用量对富硒大米中硒形态的影响由图3可知，硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸的含量随着中性蛋白酶添加量的增加而增加，酶的添加量为100 mg时，两种硒代氨基酸的含量达到最大值。 但是当酶的添加量为80 mg和100 mg时，硒形态的提取率分别为125.8%、130.5%，测出的硒形态之和大于总硒含

11、量，导致这一现象的可能原因如下：- 是酶的用量过大，导致有杂质产生或发生了转化；二是测形态用的离心管未清洗干净，残留有硒；三是测定总硒时，消解不彻底，导致总硒含量偏低。 酶的添加量为50 mg时，硒形态的提取率为88.4%，因此酶的最适添加量为50 mg。中性蛋白酶不同用量对富硒酵母中硒形态的影响本组试验选用硒含量高的样品(2000 mg/kg总硒含量3000 mg/kg)富硒酵母作为研究对象，研究添加不同的酶量，对富硒酵母中硒形态的影响，添 加的酶量分别为 0 mg、60 mg、80 mg、100 mg、120 mg、140 mg、160 mg、200 mg。试验结果如下：f 一地代胱氨酸(

12、SeCv52).晒代蛋氨酸(SeUet)Y-甲基柄代半胱氨酸 (SeMeCy :-*，亚仍酸盐(5eK)(与置)硼御表5中性蛋白酶的不同用量对富硒酹母硒形态的影响酶的用量3我提眼率011 0&026一2&085.410090.3120了45140605160G4.320072.5图4中性蛋白酶不同用量对富硒酵母中硒形态的影响由图4可知，测出的四种硒形态在酶添加量小于100 mg时，均随着酶添加量的增加而增加，在酶添加量大于100 mg时，随着酶添加量的增加， 硒代蛋氨酸的含量与硒代胱氨酸、亚硒酸盐和硒酸盐的含量呈负相关变化，造成这一现象的原因可能是：酶的添加量过高，使硒的形态之间发生了转化。

13、由表5易知，随着酶用量的增加，硒形态的提取率呈先增加后减少再增加的趋势，在酶的用量为100 mg时，硒形态的提取率达到最大值，因此酶的最适 添加量为100 mg。2.2已检样品硒的形态分析总结样品名称测出硒形态种类富硒龙须米硒代蛋氨酸(Se Met)；硒代胱氨酸(SeCys2)；亚硒酸盐(Se(W)；硒酸盐(Se(W)（4种）富硒大米硒代蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）（4种）富硒酵母粉硒代蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）（4种）富硒竹荪硒代蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸

14、（SeCys2）；甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）2（5 种）细胞提取液硒代蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）（4种）富硒花生硒代蛋氨酸（Se Met）；硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W）（4种）富硒茶叶硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）（2种）富硒样品普遍含有硒的四种形态，包括硒代蛋氨酸（SeMet）；硒代胱氨酸（SeCys2）；亚硒酸盐（Se（W）；硒酸盐（Se（W），极少数样品会含 有甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys），茶叶硒的形态分析前处

15、理方法仍需进一步改进。3硒的形态分析方法结论（1）目前，我们可以成熟的开展硒的五种形态分析。（2）目前，我们的硒形态分析方法提取效果最好的提取条件是：用链霉蛋白酶超声波提取1小时，静置提取20小时。（2）大部分富硒样品均含有硒代蛋氨酸，且硒代蛋氨酸的含量均大于硒代胱氨酸的含量。4问题（1）请问有哪些专家对硒的形态分析方面比较在行的？（2）请问在硒的形态试验过程中，样品的硒形态之间有没有可能发生相互转化？引起转化的可能原因有哪些？（3）开展硒的形态分析试验，需要用到各种硒形态的标物，但标物常常比较难买到，请问有什么途径可以比较方便的买到标物呢？茶叶硒的形态分析前处理方法，如何去除茶多酚？目前，对于市场上流通的富硒食品，大部分都只强调食品的总硒含量，而真正起作用的其实是有机硒，或者说是其中的一两种硒的形态起作用，我 们在服务企业的过程中很少有企业会做硒的形态检测，面对这一现状，您觉得我们应该如何做，才能更好的改善之一现象呢？由于标准的缺乏，富硒市场鱼龙混杂，我们打算联合企业和政府制定国家或行业富硒标准，您对我们制定标准方面有什么建议？