富硒藤茶哪里的最好（富硒藤茶有什么功效和作用）

本发明涉及生物提取领域，具体的说是一种藤茶硒多糖iv及其提取方法以及其应用。

背景技术：

1、市场现有的化学合成类降尿酸药物，部分被证实对患者有毒副作用，如肝功能异常、腹泻腹痛、表皮松懈症、皮疹、引发心血管问题和过敏反应，严重者甚至可致死亡，因此开发高效安全的降尿酸功能性食品的需求已十分迫切。植物来源的天然硒多糖具有多样性和生物活性的药效团，具有特定的空间和电子特性，可用于预防和降尿酸功能食品因子的研发。植物来源的硒多糖、多糖降尿酸的报道如下：李婷婷等[2]研究发现珍稀药用真菌桑黄sanghuangporus粗多糖通过激活肾脏abcg2转运蛋白，促进尿酸排泄并缓解肾脏的病理损伤；汪诗琪[3]研究发现桦褐孔菌多糖具有降低小鼠体内尿酸水平的能力，可以明显缓解高水平尿酸给肾脏带来的损伤作用；郭敏[4]研究发现甘草多糖可以通过抑制xod活性,阻碍尿酸合成从而减少体内尿酸浓度及减轻肝肾病理损伤的能力。

2、藤茶系葡萄科蛇葡萄属，植物名为显齿蛇葡萄[ampelopsisgrossedentata(hand-mazz)w.t.wang]，是藤本植物。藤茶是西南地区重要的特色经济作物，主要产于我国湖北、湖南、广东、江西等山区较多的省份。藤茶具有丰富的黄酮、硒多糖含量，现代药理学研究证明其黄酮成分具有降尿酸功效。但是目前关于从新食品资源藤茶来源的硒多糖降尿酸研究未见报道。仅有关于藤茶硒多糖的体外抑菌作用研究(张海青,曾红,杨洪涛等.恩施藤茶硒多糖的体外抑菌作用研究[j].微量元素与健康研究,2009,26(02):12-14.)，也未涉及从藤茶中制备硒多糖的工艺技术。目前尚无藤茶来源的高降尿酸药效、低毒副作用的硒多糖iv在用于制备预防高尿酸的功能食品因子中的应用。

3、另一方面，现有技术披露了一些从中药材瓦尼桑黄、桦褐孔菌、甘草中提取多糖用于降尿酸研究，但仍存在以下问题：其一，从中药材来源的多糖针对的人群有限；其二，提取到多糖不含硒元素。而硒元素作为人体必需的微量元素之一，具有降血糖、抗衰老、提高人体免疫力等预防保健作用。因此，从食品资源植物来源的富硒多糖具有独特的优势。其三，传统纯化工艺用于藤茶中多糖的提取时，会受到植物多酚化合物、黄酮、色素、核酸等杂质的干扰，使得藤茶硒多糖iv化合物得率和纯度低、甚至可能存在提取到其它物质导致对正常细胞的毒副作用的问题发生。

技术实现思路

1、本发明的目是为了解决上述技术问题，提供一种工艺简单、生产成本低、藤茶硒多糖iv化合物得率和纯度高的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法。

2、本发明的另一目的是提供一种由上述方法提取得到的藤茶硒多糖iv，其具有显著的体内降尿酸活性，对正常细胞无毒副作用。

3、本发明的另一目是提供一种藤茶硒多糖iv的应用。

4、为实现以上目的，本发明提供的技术方案如下：

5、一种富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，包括以下步骤：

6、1)沸水提取：取富硒藤茶打粉机粉碎获得富硒藤茶粉；将富硒藤茶粉沸水浴回流提取，0.45～2μm中空纤维超滤膜除杂，收集滤液；

7、2)乙醇沉淀除杂：向滤液中添加乙醇溶液搅拌，控制终浓度为80-85％体积百分数乙醇溶液，再静止沉淀、离心收集沉淀并冷冻干燥得到树脂；

8、3)石油醚除脂：干燥后的树脂按加入石油醚脱脂洗脱，真空干燥，得到粗硒多糖；

9、4)氨水复溶：将粗硒多糖用10％质量百分数的氨水复溶搅拌均匀，然后静止沉淀，离心收集上清溶液；

10、5)对上清液采用聚酰胺柱层析脱色：分别用去离子水洗脱、1-5％氨水洗脱、10-15％质量百分数氨水洗脱，收集氨水洗脱液作为目标洗脱液；

11、6)对洗脱液采用凝胶柱层析除杂：以10-15％质量百分数氨水洗脱，洗脱液与氨水体积比为1：100，按总洗脱体积1/5收集为一组分，收集到第四个组分即为目标洗脱液，浓缩并冷冻干燥，为精制的藤茶硒多糖iv。

12、优选的，所述步骤1)中，所述富硒藤茶中有机硒含量≥2mg/kg。

13、所述步骤1)中，沸水浴回流提取温度为98℃，时间为1.5-2.0h。

14、优选的，所述步骤2)中，所述离心转速为5000-6000rpm/min。

15、优选的，所述步骤3)中，所述石油醚洗脱的料液比为1/100～2/100。

16、优选的，所述步骤4)中，所述氨水复溶的料液比为1/400～2.5/400，所述离心转速为5000-6000rpm/min。

17、一种藤茶硒多糖iv，由上述方法制备得到。

18、优先的，所述的藤茶硒多糖iv由葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和核糖通过糖苷键连接得到，分子量范围为1；其中，水解后的单糖含量占藤茶硒多糖iv总糖含量的质量百分比为：葡萄糖50-55.47％、果糖10-12.48％、半乳糖4-4.81％、甘露糖2-3.17％、岩藻糖2-3.49％、木糖1.58-2.58％、鼠李糖0.98-1.37％、葡萄糖醛酸1.07-1.27％、核糖0.56-1.12％。

19、其中se元素通过se-o-c和se-s-c的方式结合到单糖分子上，优选其有机硒含量为0.4-1mg/kg。

20、一种藤茶硒多糖iv在制备预防高尿酸的功能性食品中的应用。

21、针对背景技术中存在的问题，发明人进行了如下改进：

22、1)采用沸水提取，能直接运用于大规模生产实践，而高温可变性蛋白等生物大分子利于后期除杂，具有操作简单、利于工业化生产的优势；选择空纤维超滤膜除杂过滤，有效去除生物大分子dna、蛋白质等杂质，为后续乙醇沉淀多糖避免了生物大分子dna、蛋白质等杂质跟着沉淀。这里应控制中空纤维超滤膜孔径为0.45～2μm，可以有效过滤固体颗粒杂质、大分子蛋白质与核酸变性形成的聚合物，过大会降低过滤效率，导致固体颗粒杂质、大分子蛋白质与核酸变性形成的聚合物透过滤膜，影响后续纯化工艺，过小会提高生产成本，容易堵塞滤膜，降低生产效率。

23、2)在除杂过滤后选择终浓度80-85％乙醇沉淀，所选择的溶剂极性介于乙醇和水之前，这是大部分的多酚、黄酮、色素等杂质极性范围，依据相似相溶的原理设计，能有效溶解大部分多酚、黄酮、色素等杂质，然后可经离心操作在上清溶液中被去除。

24、3)在石油醚除脂步骤中，创造性的选用石油醚对冻干的粗硒多糖进行萃取，这时考虑石油醚具有弱极性和渗透性，能较好溶解粗硒多糖间的脂类物质，同时石油醚具有较好的惰性不与多糖反应，有较低的沸点，挥发性较好，便于后期除去等特点，用于粗硒多糖除脂时，能够特异性的溶解质类物质，对多糖强极性物质不溶解，因此较其它传统的除脂溶剂用量更少，有效排除了水分子的干扰，溶剂与物质的接触更充分，有效溶解脂类物质，变性蛋白等大分子物质，更利于后期除杂。优选料液比(g/ml)1/100～2/100，过高会导致脂类杂质去除不充分，影响多糖的纯度，过低会浪费溶剂，增加生产成本。

25、4)在氨水复溶步骤中，首次选择10％质量百分数的氨水复溶粗多糖，此时部分蛋白在强碱性溶液中发生变性，不溶于水变成沉淀被除去；其次氨水处理在既能改变溶液hp和离子强度，也避免了传统工艺中后期脱盐处理的繁琐步骤。优选料液比(g/ml)1/400～2.5/400，过高会多糖不能充分复溶，依然保留在沉淀中，影响最后的多糖得率，过低会浪费溶剂，造成溶液中多糖浓度太低，不利于后期浓缩处理，增加生产成本。

26、5)在聚酰胺(63428-83-1,300-400目)柱层析脱色除杂过程中，依次选择去离子水洗脱、1-5％氨水洗脱、10-15％氨水洗脱，其中离子水洗脱能有效除去非活性成分的中性多糖成分，氨水的强碱性可以有效的洗脱纯化目标酸性多糖组分；dna、部分蛋白在强碱性溶液中发生变性裂解形成小分子，便于后期通过凝胶色谱除去小分子；其次氨水处理在既能改变溶液hp和离子强度，也避免了传统工艺中后期脱盐处理的繁琐步骤。

27、6)最后在凝胶(sephadexg-25)色谱柱层析除杂过程中，以收集到第四个组分即为目标洗脱液，浓缩并冷冻干燥，最终得到的茶硒多糖iv得率≥5％，纯度达≥98％，且se元素通过se-o-c和se-s-c的方式结合到单糖分子上，有效除杂的前提下，最大程度的保留了有机硒，有机硒含量为0.4-1mg/kg。

28、进一步研究发现，提取的藤茶硒多糖iv由葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和核糖通过糖苷键连接得到，分子量范围为1。而这种藤茶硒多糖iv化合物对具有显著的降血尿酸、缓解高尿酸造成的肾损失的功效，在降尿酸的过程中还具有一定的护肾功效，并对且还同时对正常人肾皮质近曲小管上皮细胞hk-2没有毒副作用，适合长期服用。

29、基于上述发现，本发明制备的藤茶硒多糖iv可以用于在制备预防高尿酸的功能性食品中的应用，经换算后，70kg成年人每天的食用量仅为4.81-19.23g，可加入其它辅料制成食品药学上可接受的任意剂型，如固体饮料、速溶茶、罐装液体饮料、冲剂等。

30、有益效果：

31、本发明工艺简单、生产成本低、藤茶硒多糖iv得率和纯度高，制备得到的藤茶硒多糖iv能够用于制备预防高尿酸的功能性食品，具有良好的护肝肾功效，对正常细胞没有伤害作用，可以长期服用。

技术特征：

1.一种富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述富硒藤茶中有机硒含量≥2mg/kg。

3.如权利要求1或2所述的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，所述步骤1)中，沸水浴回流提取温度为98℃，时间为1.5-2.0h。

4.如权利要求1所述的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，所述步骤2)中，所述离心转速为5000-6000rpm/min。

5.如权利要求1所述的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，所述步骤3)中，所述石油醚洗脱的料液比为1/100～2/100。

6.如权利要求1所述的富硒藤茶中提取藤茶硒多糖iv的方法，其特征在于，所述步骤4)中，所述氨水复溶的料液比为1/400～2.5/400，所述离心转速为5000-6000rpm/min。

7.一种藤茶硒多糖iv，其特征在于，由权利要求1-6任一项方法制备得到。

8.如权利要求1所述的藤茶硒多糖iv，其特征在于，其由葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸和核糖通过糖苷键连接得到，分子量范围为1；其中，水解后的单糖含量占藤茶硒多糖iv总糖含量的质量百分比为：葡萄糖50-55.47％、果糖10-12.48％、半乳糖4-4.81％、甘露糖2-3.17％、岩藻糖2-3.49％、木糖1.58-2.58％、鼠李糖0.98-1.37％、葡萄糖醛酸1.07-1.27％、核糖0.56-1.12％。

9.一种藤茶硒多糖iv在制备预防高尿酸的功能性食品中的应用。

技术总结

本发明涉及生物提取领域，具体的说是一种藤茶硒多糖IV及其提取方法以及其应用。本发明采用沸水提取、乙醇沉淀除杂、石油醚除脂、氨水复溶、对上清液采用聚酰胺柱层析脱色、对洗脱液采用凝胶柱层析除杂、最后浓缩并冷冻干燥制得精制的藤茶硒多糖IV。本发明工艺简单、生产成本低、藤茶硒多糖IV得率和纯度高，制备得到的藤茶硒多糖IV能够用于制备预防高尿酸的功能性食品，具有良好的护肝肾功效，对正常细胞没有伤害作用，可以长期服用。

技术研发人员：李宇,何美军,孙慧茹,罗建群,谭生权,袁晓曼,彭诗琴,黄东海,方昕悦

受保护的技术使用者：湖北省农业科学院中药材研究所

技术研发日：

技术公布日：2024/4/22