硒酵母作为补硒计量（硒酵母用量多少微克）

广州食品工业科技 Guan时 必】F【I】d sdence and T Dgy v0l 16 No．3(总 63) 33 ；一 富硒酵母 中硒含量的测定 刘曲滨 惠燕① 肖方正 陈子健 6 7 门生物技术开发中心江门52~81) S占／占，／7 摘 要 本文报道 了一种简便可靠的测定富硒酵母中硒含量的方法 。采用双氧水 ：高氯酸：硫酸 =3：3：I的消 化液处理样品，用联苯胺 比色法测定样品总硒含量，回收率达 96 9％，变异系数为 l_64。 关键词里；查壁壁里；垦苎壁些皇鲨 投 定 司丰牛 扣 』 Abstract The determlnati~ oi sel Llm se1enLLⅡn— 日1丌ched yeast by dlph~ ylamme sI ctm 时ry was smdi~ wh衄 a dighting~[utlonof hyd 曜邮 peromde：hyp町chl c add：su]ph血c add=3：3：1 was used，the r∞ dy of the meth~ was ab。ut 96 9％ ．while the va at ∞ coeffi~t 0f the measurem~t was I．64． K￡y orcb 9den1urn； kniLⅡn—er ched yeast；djphenyla ne spectⅡ try 硒是生物体所必需的微量营养元素之一， 大量研究表明 ，硒能起抗癌、保护心肌、防治克 疝病、大骨节病等作用_1一 J。

在 以谷类蔬菜为 主的膳食不易满足硒的 日需量、以及地区性水、 土缺硒的情况下，补硒对生物体是非常必要的。 目前国际盛行的高效无毒补硒制品有 ：有机硒 酵母、亚硒酸钠片剂等；我国现在用于防治克疝 病和作为饲料添加剂的硒主要是无机硒类化合 物——亚硒酸钠。无机硒和有机硒相比，其生 物活性较低而毒性较大。现阶段我国缺硒现象 是普遍存在的，通过食品途径强化硒元素，已成 为目前功能性食品的研 究热 点之一 。我国 也研制了多种富硒制剂和食品，以便于人们有 针对性地进行补硒 其中富硒酵母中有机硒含 量较高，是一种比较理想的硒添加剂和新型饲 料添加剂。富硒酵母中硒含量的测定在其研究 开发、规模化生产及推广应用中是必不可少的。 硒的测定方法有紫外 一可见光度法l3,5,6-、 气相色谱法、分子荧光法【7,8,9,10-、极谱法、原子 吸收法【11,12 J、电感偶合等离子光谱法L13-等，其 中紫外 一可见光光度法、荧光法、原子吸收法较 为常用 除可见光度法(比色法)以外的各种方 法都需要特殊的检测仪器。在硒酵母的研究开 ① 包惠燕工作单位：暨南大学食品科技研究中心 发中需要一种简便快速的测定方法 在富硒酵 母的研究开发中，使用联苯胺 比色法钡I定硒酵 母中的硒含量，发现用不同的消化液处理样品， 测定结果有显著差异，本文是有关的研究报道。

l 材料与方法 l l 试样 广东江门生物技术开发中心富硒 酵母 1．2 仪器设备 721分光光度计 普通电炉 通风橱 1．3 试剂 分析纯硝酸、高氯酸、硫酸、双氧水、甲苯； 40％氨氧化钠溶液、5％氨氧化钠溶液、2n∞l／L 甲酸溶液、0．5％3，3％ 一二氨基联苯胺溶液(现 用现配)、5％EDTA一2Na溶液 l 4 标准硒贮备液(1 00mg／m1)及标 准硒工 作液：精密称取已标定的亚硒酸钠(分析纯)，加 硝酸溶液(1：30)制成每毫升含 1_00r嚷 硒的溶 液即为标准硒贮备液；精密量取标准硒贮备液 l m1，用硝酸溶液 (1：30)定容至 l00mI即为标 准硒工作液。 1 5 方法 l 5．1 样品消化 精确称取 0．3～0 7g富硒酵 维普资讯 广州食品工业科技 Guang,zhou Food Science and Technology vo1．16 No．3(总 63) 母于 150ml高脚烧杯中(加标回收试验另精密 量取标准硒贮备液 0．3ml于烧杯中)，加少量水 湿样，加消化液，摇匀，待气泡平息后加盖表面 皿，置通风橱内的电炉上消化至终点，若消化不 完全可稍冷后补加双氧水继续加热消化至完 全 冷后用少量水冲洗 表面皿及瓶壁，加 5％ EDTA一2Na溶液 2ml，摇匀，用 40％氢氧化钠 于冷水浴中调 pH至中性 (可用溴百里香酚蓝 作指示剂)，然后定容至 100m]，同法做空 白溶 液。

消化液 A 双氧水 ：高氯酸：硫酸=3：3：1 消化液 B 高氧酸：硫酸 ：3：1 消化液 C 硝酸：高氯酸 ：硫酸=3：2：l 消化液 D 双氧水 ：硫酸 =1：1 人与消化液等量 的空白溶液及标准硒工作液 O O，2 0，4．0，6．0，8．0，10．0ml，加水适量，用 5％氢氧化钠溶液调 pH至中性 ，加 2tool／L甲 酸溶液 3ml，然后加水至 35ml，摇匀(pH应为 2 0–3．0)，各加 0．5％3，3％ 一二氨基联苯胺 溶液 5ml，摇匀，置暗处反应 30rain，用 5％氢氧 化钠溶液调 pH6 5～7 0，精 密加 入 甲苯 10ml， 振摇萃 取 1rain，静 置分 层，取 甲苯层 滤液于 lcm 比色皿中，在波长 420nm 处测定吸光度 用标准硒工作液的吸光度绘制标准曲线，从标 准曲线上查出与消化液的吸光度对应的硒含 量 。 2 结果与分析 1 5．2 样 品测定 精密量取适量消化 液于 2 1 用不同消化液消化测定结果 125m1分液漏斗中，另取 7个分液漏斗，分别加 试验结果见表 1。 表 l 不同消化液白匀测定结果 由表 1可知，用不同消化液消解样品所得 的测定值及精密度不同。

对不同消化液所得精 密度进行 F检验如下 ： F(B，A)= ／s^2=515／117=4 40>F0 05(7，7) = 3 79 消化液 A与 B消化样品的精密度有显著 差异 ，A优于 B。 F(C，A)= ／s^。 1 07×10 ／117=9 15>F0 0『 (5，7)=7 46 消化液 A与 C消化样品的精密度有显著 差异，A优于 C。 F(D，A)=si ／S^2：2 31×10 ／117：19 7>F0 0『 (3，7)：8 45 消化液 A与 D消化样品的精密度有显著 差异 ，A优于 D。 由此可见用消化液 A所测得的硒含量值 精密度最高。 2 2 加标回收率试验 经不同消化液处理的加标回收率试验结果 见表 2 表 2 加标回收率试验 由表 2可知，用不同消化液处理后，加标回 收率不同，用 A、B、C三种消化液的回收率比较 接近，消化液 D不宜采用。 从精密度和回收率综合考虑，富硒酵母硒 含量的测定以选择消化液 A为宜 采用消化液 A用本法测得的样品总硒含 量与中科院广州分析测试中心采用石墨炉原子 吸收法测得的结．~(672mg／kg)相近。 3 结论 用 3，3一二氨基联苯胺比色法测定富硒酵 维普资讯 广州食品工业科技 Guangzhou Fco：：l Science and Techr~qgyⅧl 16 No 3(总 63) 35 母中的硒含量时，以双氧水：高氯酸 ：硫酸 =3： 3：1的混合消化液消解样品，加标回收率达 96． 9％，变异系数 l 64，此法快速简便 ，重现性 好 参 考 文 献 l 王少为．人体必需微量元 素——硒．广东微量元素 科学，1999，6(6)：50-51 2 黄益民．虞欣，韩玲等．微量元素硒对人红细胞流变 性的保护作用 北京 生物医学 工程．1998，17(2)： 100～107 3 郝素娥 ，朦冰，韩喜江 硒酵母培养过程中亚硒酸钠 添加量对硒酵母 中硒含量分 布的影响 精细化工． 1997 14(1)：27～28 4 郑建仙，李璇 粮 油睬加工及食品硒 的天然有 机化 及在 答物 食品 中应用 的研究．粮食与饲 料 工业， 1997，(8)：30–32 5 李富 紫外分光光度法测定微量元 素硒 ．微量元 素 与健康研究 ．1998，15(1)：65 6 夏静 ，檀华蓉 蔬菜 中微量硒 的比色测定．安徽农 业科学，1997，25(3)：278-279 7 李剑华 ，龚书椿 饮用水中硒的形态分析——2．3一 二氪基綦光度法测定硒(Ⅳ)、硒Ⅵ)及总硒含量 食 品与发酵工业 ．1999．25(2)：47～51 8 解宏智 ．陈亮 ．周纪侃 荧光法测定蘑菇及其水解 液中痕量硒的研究 分析测试学报 1998，17(1)：61 — 63 9 秦 日方，植物中有机硒吉量的测定无锡轻工大学学 报 1998，17(4)：74～77 l0 王守兰，陈永剐 荧光光度法测定富硒 术、富硒茶 中痕量硒含量．光谱实验室 1998．15(L)：34-36 1l 童开源，郭小伟．连续流动氢化物发生 一原子吸收 光谱 法测 定地 质样 品 中 痕量 硒 分析 实 验 室 ． 1997，16(2 J：51～54 l2 任建成 ，王怀友，张 晓凯 等 石 墨炉原子吸收法测 定饮料中硒 光谱学与光谱分析．1997．17(4)．92 ～ 95 13 黄渊泽 ．殷 国健，王光灿 等 富硒食用菌 中的硒 吉 量 云南大学学报(自然科学版)，1997，19(4)：341 ～ 343 作者简介：支lI曲滨，工程师 ．从事发 酵工 艺及新产 品研究开发工作。

(上接第 3页) 3 结论 3．1 辣椒 自然发酵的第 7–8天开始出现组织 软化和质量变化。 3 2 在辣椒 自然发酵过程中，发酵微生物分泌 果胶酶分解果胶，是组织软化的主要原因。 3 3 乳酸菌的迅速生长 ，pH的迅速下降是优 质辣椒乳酸发酵的技术关键。消耗有机酸的酵 母菌及丁酸菌等菌种的生长，限制了辣椒 自然 发酵过程中 pH的下降。辣椒发酵过程中 pH 的变化还受缓 冲能力的影响，盐腌法制作的发 酵辣椒产 品缓 冲能力较强，故 pH 变化缓 慢。 缓冲能力与系统 的某些可溶性物质有关，发酵 微生物水解蛋 白质产生的游离氨基酸和短肽可 起到缓冲作用。 3．4 发酵原料的含糖量对蔬菜发酵产品的风 牧韩 日期 1999 I2 7 味有很大影响，含糖量高的蔬菜原料经乳酸发 酵风味较好。在蔬菜发酵过程中加入一定量的 糖有利于生产优质的乳酸发酵辣椒产品 总之，要得到高质量的发酵辣椒，发酵之初 pH的迅速下降很重要。因此，必须提供适宜条 件，在能保证发酵系统必要的微生物菌群 良好 生长，以提供丰富的风味的前提下，使乳酸菌在 发酵前期优势生长，迅速产酸，抑制不 良菌种的 生长，以保证发酵辣椒的质量稳定。 参 考 文 献 l 杨洁彬等编 乳酸菌 ：生物学基础及应用 中国轻工 业出版社 ．1996 2 大连理 工大学等校编 食品分 析 轻 工业出版 社、 1996 3 章善生 中国酱腌苹 中国商业出版社、1994 3 4 编译组．应用食品学 中国食品出版杜 1988 5 植樯 日耜 20(n 2 22 维普资讯