富硒产品怎么检测（富硒产品怎么检验）

本发明涉及肽活性检测，具体为一种富硒植物的肽活性检测方法。

背景技术：

1、硒是人体必需的微量元素，参与合成人体内多种含硒酶和含硒蛋白，能提高人体免疫，促进淋巴细胞的增殖及抗体和免疫球蛋白的合成。同时，硒也被成为人体微量元素中的“抗癌之王”，已有科学研究表明，血硒水平的高低与癌的发生密切相关，大量的调查资料也说明，一个地区食物和土壤中硒含量的高低与癌症的发病率有直接关系，然而富硒植物不仅仅是其含有的硒对人体产生积极的效果，同时，其含有的植物肽同样具有较高的生物活性。

2、因此，对于富硒植物的研究得到不断的拓展，随着生物化学、基因工程技术的迅速发展,人们对多肽产品已经有了突飞猛进的认识，多肽产品在多个领域都有了非常广泛的利用，特別是多肽产品的抑菌活性方面的作用越来越受到重视，然而，富硒植物多肽的抑菌活性需要进行检测，现有的检测方法相对单一，检测的抑菌活性相对较低。

3、基于此，我们提出了一种富硒植物的肽活性检测方法，希冀解决现有技术中的不足之处。

技术实现思路

1、(一)解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种富硒植物的肽活性检测方法。

3、(二)技术方案

4、为实现上述的目的，本发明提供如下技术方案：

5、一种富硒植物的肽活性检测方法，包括以下步骤：

6、(1)首先，将富硒植物采用清水清洗干净，然后进行晾干；

7、(2)将经过清洗后的富硒植物采用疏解液进行浸泡处理2-3小时，得到预处理富硒植物；

8、(3)将上述预处理富硒植物进行冷冻粉碎，然后再进行研磨处理，得到富硒植物粉；

9、(4)将上述制备得到的富硒植物粉添加到水中，搅拌均匀后，调节温度至85-90℃，水浴保温，并以500r/min转速进行搅拌20min，得到混合液；

10、(5)调节混合液ph至9.1，降低温度至40-45℃，水浴保温20min，然后按料液比30:1的质量比例再添加蛋白酶，搅拌3-4小时，然后进行高速离心处理，静置2小时，取上清液并过10kd的超滤管处理；

11、(6)向上述得到的上清液中添加硫酸铵，搅拌均匀，在常温下，以200r/min转速搅拌1小时，过滤得到沉淀，粉碎；

12、(7)将hac-naac缓冲溶液与上述沉淀料进行混合，然后上sephadexg25凝胶柱，双蒸水洗脱，然后进行冷冻干燥，得到纯化富硒植物多肽粉；

13、(8)取mh培养基培养的处于对数生长期的金黄色葡萄球菌，采用无菌生理盐水稀释得到菌液，取10ml的菌液均匀涂布于lb平板上，在无菌环境下，30℃保温，放置20min，将无菌空白药敏纸片贴于平板表面，各纸片中心之间距离大于20mm，纸片距平板內缘大于20mm，将纯化富硒植物多肽粉与生理盐水混合混合，得到肽液；

14、将肽液滴加到纸片上，于35℃下倒置培养20小时，测量抑菌环直径，即可。

15、作为进一步的技术方案，所述步骤(2)所述疏解液为碳酸钠溶液；

16、所述碳酸钠溶液质量分数为8.5％；

17、富硒植物与碳酸钠溶液混合质量比为1:10-12。

18、作为进一步的技术方案，所述步骤(3)中富硒植物粉目数为350目。

19、作为进一步的技术方案：步骤(4)中富硒植物粉与水混合质量比为1:20-25。

20、作为进一步的技术方案：步骤(6)中上清液中添加硫酸铵为向100g的上清液中添加6-7g的硫酸铵。

21、作为进一步的技术方案，步骤(7)中hac-naac缓冲溶液、沉淀料混合比例为280ml：6-8g；

22、所述sephadexg25凝胶柱的柱长86cm，直径3cm，上样量为10ml，双蒸水洗脱，流速2.5ml/min。

23、作为进一步的技术方案，步骤(8)中菌液浓度为0.4-0.45麦氏标准浓度单位。

24、作为进一步的技术方案：步骤(8)中所述肽液为1-3g纯化富硒植物多肽粉与50ml的生理盐水进行混合。

25、作为进一步的技术方案：步骤(8)中肽液滴加到纸片量为60μl/片。

26、本发明得到的纯化富硒植物多肽粉的相对分子质量大约是900da。

27、(三)有益效果

28、与现有技术相比，本发明提供了一种富硒植物的肽活性检测方法，具备以下有益效果：

29、本发明通过采用疏解液对富硒植物进行浸泡处理，不仅，能够进一步的去除富硒植物表面附着的微杂质，同时，能够对富硒植物组织细胞进行疏解，提高溶胀性，对富硒植物组织会进行进一步的疏松，从而有利于对富硒植物肽的提取，便于后续检测其活性。

30、富硒植物细胞壁内部含有一些伸展蛋白和顽固性的附着蛋白，它们的立体结构紧密并且更加复杂，而且这些附着蛋白的酶切位点被包藏在蛋白质分子内部，很难被蛋白酶水解，特别是包埋在膳食纤维中的伸展蛋白，是一种具有特殊结构的糖蛋白，因此，本发明通过采用疏解液进行预处理，然后再后续的连续处理的结合，从而能够极大的提高富硒植物肽的提取率，相较于常规提取方法提高了20％以上，并且纯度更高，经过检测，其肽活性更高，具有更强的抑菌活性。

技术特征：

1.一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于，所述步骤(2)所述疏解液为碳酸钠溶液；

3.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中富硒植物粉目数为350目。

4.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于：步骤(4)中富硒植物粉与水混合质量比为1:20-25。

5.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于：步骤(6)中上清液中添加硫酸铵为向100g的上清液中添加6-7g的硫酸铵。

6.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于，步骤(7)中hac-naac缓冲溶液、沉淀料混合比例为280ml：6-8g；

7.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于，步骤(8)中菌液浓度为0.4-0.45麦氏标准浓度单位。

8.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于：步骤(8)中所述肽液为1-3g纯化富硒植物多肽粉与50ml的生理盐水进行混合。

9.根据权利要求1所述的一种富硒植物的肽活性检测方法，其特征在于：步骤(8)中肽液滴加到纸片量为60μl/片。

技术总结

本发明涉及肽活性检测技术领域，且公开了一种富硒植物的肽活性检测方法，包括以下步骤：(1)清洗；(2)得到预处理富硒植物；(3)得到富硒植物粉；(4)得到混合液；(5)蛋白酶处理，高速离心处理，静置，取上清液并过10kD的超滤管处理；(6)添加硫酸铵，沉淀，粉碎；(7)得到纯化富硒植物多肽粉；(8)测量抑菌环直径，即可；本发明通过采用疏解液对富硒植物进行浸泡处理，不仅，能够进一步的去除富硒植物表面附着的微杂质，同时，能够对富硒植物组织细胞进行疏解，提高溶胀性，对富硒植物组织会进行进一步的疏松，从而有利于对富硒植物肽的提取，便于后续检测其活性。

技术研发人员：陈起锐

受保护的技术使用者：安徽草珊瑚生物科技有限公司

技术研发日：

技术公布日：2024/1/15