食品中硒补加硝酸（硒与硝酸反应）

前 言

本标准代替GB5009.93—2010《食品安全国家标准 食品中硒的测定》1、GB/T21729—2008《茶叶中硒含量的检测方法》、SN/T0860—2000《出口蘑菇罐头中硒的测定方法 荧光分光光度法》和SN/T0926—2000《进出口茶叶中硒的检验方法 荧光光度法》。

本标准与GB5009.93—2010相比,主要变化如下:

———保留氢化物原子荧光光谱法为第一法,荧光分光光度法为第二法;

———增加电感耦合等离子体质谱法为第三法。2

范围本标准规定了食品中硒含量测定的氢化物原子荧光光谱法、荧光分光光度法和电感耦合等离子体质谱法。

本标准适用于各类食品中硒的测定。2

氢化物原子荧光光谱法原理试样经酸加热消化后,在6mo1/L盐酸介质中,将试样中的六价硒还原成四价硒,用硼氢化钠或硼氢化钾作还原剂,将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢,由载气(氩气)带入原子化器中进行原子化,在硒空心阴极灯照射下,基态硒原子被激发至高能态,在去活化回到基态时,发射出特征波长的荧光,其荧光强度与硒含量成正比,与标准系列比较定量。2

试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。

试剂

硝酸(HNO3):优级纯。

高氯酸(HClO4):优级纯。

盐酸(HCl):优级纯。

氢氧化钠(NaOH):优级纯。

过氧化氢(H2O2)。

硼氢化钠(NaBH4):优级纯。

铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。

试剂的配制

硝酸-高氯酸混合酸(9+1):将900mL硝酸与100mL高氯酸混匀。

氢氧化钠溶液(5g/L):称取5g氢氧化钠,溶于1000mL水中,混匀。

硼氢化钠碱溶液(8g/L):称取8g硼氢化钠,溶于氢氧化钠溶液(5g/L)中,混匀。现配现用。

盐酸溶液(6mol/L):量取50mL 盐酸,缓慢加入40 mL 水中,冷却后用水定容至100 mL,混匀。

铁氰化钾溶液(100g/L):称取10g铁氰化钾,溶于100mL水中,混匀。

盐酸溶液(5+95):量取25mL盐酸,缓慢加入475mL水中,混匀。2

标准品

硒标准溶液:1000mg/L,或经国家认证并授予标准物质证书的一定浓度的硒标准溶液。

标准溶液的制备

硒标准中间液(100mg/L):准确吸取1.00mL硒标准溶液(1000mg/L)于10mL容量瓶中,加盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀。

硒标准使用液(1.00mg/L):准确吸取硒标准中间液(100mg/L)1.00mL于100mL容量瓶中,用盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀。

硒标准系列溶液:分别准确吸取硒标准使用液(1.00mg/L)0mL、0.500mL、1.00mL、2.00mL和3.00mL于100mL容量瓶中,加入铁氰化钾溶液(100g/L)10mL,用盐酸溶液(5+95)定容至刻度,混匀待测。此硒标准系列溶液的质量浓度分别为0μg/L、5.00μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L 和30.0μg/L。

注:可根据仪器的灵敏度及样品中硒的实际含量确定标准系列溶液中硒元素的质量浓度。2

仪器和设备注:所有玻璃器皿及聚四氟乙烯消解内罐均需硝酸溶液(1+5)浸泡过夜,用自来水反复冲洗,最后用水冲洗干净。

原子荧光光谱仪:配硒空心阴极灯。

天平:感量为1mg。

电热板。

微波消解系统:配聚四氟乙烯消解内罐。

分析步骤试样制备

注:在采样和制备过程中,应避免试样污染。

粮食、豆类样品

样品去除杂物后,粉碎,储于塑料瓶中。

蔬菜、水果、鱼类、肉类等样品

样品用水洗净,晾干,取可食部分,制成匀浆,储于塑料瓶中。

饮料、酒、醋、酱油、食用植物油、液态乳等液体样品

将样品摇匀。

试样消解

湿法消解

称取固体试样0.5g~3g(精确至0.001g)或准确移取液体试样1.00mL~5.00mL,置于锥形瓶中,加10mL硝酸-高氯酸混合酸(9+1)及几粒玻璃珠,盖上表面皿冷消化过夜。次日于电热板上加热,并及时补加硝酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟产生时,再继续加热至剩余体积为2mL左右,切不可蒸干。冷却,再加5mL盐酸溶液(6mol/L),继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现。

冷却后转移至10mL容量瓶中,加入2.5mL铁氰化钾溶液(100g/L),用水定容,混匀待测。同时做试剂空白试验。

微波消解

称取固体试样0.2g~0.8g(精确至0.001g)或准确移取液体试样1.00mL~3.00mL,置于消化管中,加10mL硝酸、2mL过氧化氢,振摇混合均匀,于微波消解仪中消化,微波消化推荐条件见附录A(可根据不同的仪器自行设定消解条件)。消解结束待冷却后,将消化液转入锥形烧瓶中,加几粒玻璃珠,在电热板上继续加热至近干,切不可蒸干。再加5mL盐酸溶液(6mol/L),继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现,冷却,转移至10mL容量瓶中,加入2.5mL铁氰化钾溶液(100g/L),用水定容,混匀待测。同时做试剂空白试验。2

测定

仪器参考条件

根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为:负高压340 V;灯电流100 mA;原子化温度800℃;炉高8mm;载气流速500mL/min;屏蔽气流速1000mL/min;测量方式标准曲线法;读数方式峰面积;延迟时间1s;读数时间15s;加液时间8s;进样体积2mL。

标准曲线的制作

以盐酸溶液(5+95)为载流,硼氢化钠碱溶液(8g/L)为还原剂,连续用标准系列的零管进样,待读数稳定之后,将标硒标准系列溶液按质量浓度由低到高的顺序分别导入仪器,测定其荧光强度,以质量浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标,制作标准曲线。

试样测定

在与测定标准系列溶液相同的实验条件下,将空白溶液和试样溶液分别导入仪器,测其荧光值强度,与标准系列比较定量。2

分析结果的表述试样中硒的含量按式(1)计算:2

……………………(1)

式中:

X ———试样中硒的含量,单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L);

ρ ———试样溶液中硒的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);

ρ0 ———空白溶液中硒的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);

V ———试样消化液总体积,单位为毫升(mL);

m ———试样称样量或移取体积,单位为克或毫升(g或mL);

1000 ———换算系数。

当硒含量≥1.00 mg/kg(或mg/L)时,计算结果保留三位有效数字,当硒含量