仔猪补硒几毫升（毫升补仔猪硒含量多少）

技术领域

本发明涉及一种兽医用药品，具体的说是一种治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的中药注射剂及其制备方法。

背景技术

生态猪生产是我国畜牧业发展的一个主要产业之一，也是我国畜牧产品出口创汇的一个主要支柱，是在增加国民收入和提高人民生活水平方面、加快农牧业发展、调整农业产业化结构等方面的重要目标。近几年来，在我国政府、科研部门和大型生态猪生产企业共同努力下，我国畜牧业发展迅速，特别是河北、山东等省畜牧业生产态势良好，然而猪链球菌和猪瘟混合感染病有趋于严重的态势。近年来，屡屡报导链球菌病和猪瘟混合感染，给养猪场造成了重大经济损失。

发病原因主要有疫苗免疫不到位或免疫程序不科学：未做免疫，或疫苗运输、保存、使用不当，造成免疫效果差或无效；消毒不到位：链球菌病多由外伤感染引起，如器械、环境消毒不严造成伤口感染，子猪的断脐、断尾，3~4日龄的补铁、补硒注射，阉割，疫苗的免疫注射等操作过程中消毒不严造成感染；防范不到位：猪瘟病毒侵入猪场、患有免疫抑制性猪病、原虫感染加之防治不到位，造成继发感染等。

临床症状：病猪突然精神不振，食欲减退或废绝，先拉稀后便秘，卧地不愿站立，体温升高为40.5℃~42℃，眼角有眼屎，喜扎堆，耳、腹部、四肢末端、肛门、尾巴，尤其是股内侧、后腿叉上部有紫红色或蓝紫色出血斑，急性的全身发红，突然倒地，阵发痉挛而死，稍缓和的后肢摇摆，站立不稳，有的出现后肢软瘫，有的关节肿大，后期多数倒地出现神经症状，如阵发性痉挛、四肢划动、口吐白沫等，后期体温降低，腹部皮下有紫红色出血点，出血点后期变为褐色，乳头变褐，全身皮毛黯淡无光，体温低于常温，衰竭而死。

病理变化：急性的全身表现败血症变化，往往来不及治疗即死亡。慢性的眼睑肿胀，切开有液体流出，淋巴结初期肿大，后期坏死，呈黑褐色，切面呈大理石花纹样。剖开病死猪腹部皮肤，皮肤内侧有零星的黑褐色点状，肺脏充血、出血，有的胸腔积液，积液遇空气呈胶冻样，心肌面有弥漫性出血点，脾脏肿大，周边有出血梗死或紫黑色坏死灶，肝脏表面有出血点及坏死，肾脏肿大，有出血点或出血斑，膀胱内壁有出血点，小肠、结肠有炎性变化，有的脑膜或脑实质出血，有的关节肿大，剖开有黄色胶冻样液体物。

临床诊断：一、发病前期多有外伤史；二、有猪瘟疫苗免疫不到位的情况；三、病猪腹部皮下有明显出血点，后腿叉上部有出血斑；四、多数病猪后肢有站立不稳现象；五、结合流行病学调查、临床症状、病理解剖等综合分析作出初步诊断，必要时通过实验室诊断确诊。

猪链球菌与猪瘟混合感染发病特点为：为急性，发病快，病程短，死亡率高，以高热、败血、神经症状和关节肿大为主，因多达11个血清群致病，有限几个血清群或型（C、D、E群和II型）的疫苗，对此病的预防根本无济于事，加以其耐药性强，耐药谱广，抗生素治疗经常无效。当猪场爆发此病时，经常陷入无计可施的困境。

目前国家采用抗生素来防控，磺胺类药、补液、强心；大剂量青霉素、磺胺类等，每天2次，连用3-4天；严重病例，静注50%葡萄糖、0.9%生理盐水250毫升，10%安钠咖10毫升、VC1500毫克，每天1次，连用3天；小诺霉素120毫克/头、柴胡2毫升混合注射，每天4次，连用2-3天；氯霉素25毫克/千克与5%葡萄糖氯化钠混合静注，每天2次；5%恩诺沙星3毫升+柴胡2毫升混合肌注，3次/天，用药2-3天；氯丙嗪2毫克/千克肌注，每天2次，连用2-3天；该病原对以上所用的化学药品较敏感，但毒副作用大，有不同程度的致癌致畸。抗生素残留超标，生态猪出口在海关检疫时而受阻，导致了生态猪出口难的现状，制约了生态猪产业健康稳定发展，尤其是加入WTO以后，外国政府往往以此为借口拒绝进口中国的生态猪产品，并且大量不符合出口标准的产品转入国内消化，对我国人民的身体健康造成了潜在危害。

农业部已制定出《无公害食品—猪肉》的行业标准（NY5029-2001），规定了无公害猪肉的感官指标、理化指标、微生物指标等。2011年3月曝光的“瘦肉精”事件就能体现出人们对无公害猪肉的呼吁越来越高，化学药品有毒副作用，对人的身体有极大危害。

发明内容

本发明的目的就是提供一种疗效好、疗程短、用量少、成本低、残留少的治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的中药注射剂及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案是：

一种治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的中药注射剂，由下述重量份的中药材经水提蒸馏醇沉法提取而制成注射液或者冻干粉针：金银花4-10份、黄芩3-9份、柴胡3-9份、地黄2-8份、栀子2-5份和橘皮2-4份。

优选的，金银花6-8重量份、黄芩5-7重量份、柴胡5-7重量份、地黄4-6重量份、栀子2-4重量份和橘皮2-4重量份。

更优选的，金银花7重量份、黄芩6重量份、柴胡6重量份、地黄5重量份、栀子3重量份和橘皮3重量份。

本发明还提供了一种治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的中药注射剂的制备方法，其按照下述步骤进行：

（1）将柴胡和金银花经水蒸气蒸馏，收集重蒸馏液,备用；

（2）将黄芩、地黄、栀子和橘皮与步骤（1）产生的药渣及蒸馏后的水溶液合并，加水煎煮3次，滤过，用乙醇沉淀，滤过，滤液回收乙醇后，加入步骤（1）所述重蒸馏液，然后按照常规方法制成注射液或者采用冷冻干燥的方法将其制成干粉注射制剂。

上述技术方案是根据猪的生理特性及病患猪的病原分离、血清学调查和中兽医理论，从拟订的中药组方、单味中药或中药有效成分，进行体内、体外防治试验，筛选出的最佳组方。

本发明治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的方解如下：

金银花：味甘性寒，气味芳，既可清气分热透疏表，又能解血分热毒，且在清热之中又有轻微宣散之功，尤为治阳性疮疡的药。现代报道为清热解毒之首选药。金银花在试管内对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌等均具较强的抑制作用。有效成份绿原酸（C16H18O9），有较强的抗病原微生物，有明显的抗病毒作用。

黄芩：苦，寒。入心、肺、胆、大肠、小肠经。功效：清热燥湿，泻火解毒，泻上焦之肺火，除肠中温热，现代报道，黄芩主要成份：黄芩苷（C21H18O11）。对伤寒杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、流感病毒等有抑制作用。

柴胡：性味苦、平。入心包络、肝、三焦、胆经。功效：能透表、退热，疏肝解郁，又可升举阳气。具有抗炎、解热与降温，镇静，镇痛，镇咳，抗肝损害等作用。

地黄：甘、苦、寒。入心、肝、肾经。功效：清热凉血，生津。用于热病热邪入营，舌绛口渴，或身发斑疹，或阴虚火盛，咽喉焮肿，以及血热妄行引起的衄血等症—泻火而凉血，气清质润，能清营血之邪热、凉血滋阴、并且具有生津作用。现代报道，主要成份：含地黄素、甘露醇、葡萄糖、铁质、维生素A等。

栀子：苦、寒。归心、肺、三焦经。功效：用于热病心烦，黄疸尿赤，血淋涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛。

橘皮：辛苦，温。入脾、肺经。功能主治：理气，调中，燥湿，化痰。治胸腹胀满，不思饮食，呕吐哕逆，咳嗽痰多。

方义：本方重用金银花为君药。金银花既可清气分热透疏表，又能解血分热毒，具在清热之中又有轻微宣散之功，对溶血性链球菌有较强的抑制作用。黄芩为臣药，黄芩“能治热毒”、“解瘟疫”、“消痰利气”。本方中柴胡、地黄、栀子、橘皮为佐、使药；柴胡透表退热，疏肝解郁，升举阳气；地黄清热凉血生津；栀子清热泻火，凉血解毒。能轻清上行，泻肺火，去肌表热，又能泻三焦火，凉血清心热。橘皮理气，调中，燥湿化痰。诸药合用，共奏清热解毒，抗菌，抗病毒，凉血祛瘟之功。经过几年的试验，经过对河北、山东、河南三省不同规模的猪场暴发的诊断为链球菌并发猪瘟的病例，经病原分离鉴定及体内外药敏试验，筛选出最佳配伍方案，其抗病毒、抗细菌并发猪瘟混合感染病的防治优于大多数抗生素和抗病毒药物。

毒性试验，将本发明治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的注射剂给40只小白鼠，注射2mL药液每千克，相当猪用量的20倍，观察期间动物饮食正常，未见动物死亡，注射后，活动有所减少，但动物生存状态良好，8h后恢复正常，说明用该药是安全的。

采用上述技术方案产生的有益效果在于：1）本发明为纯中药制剂，不含任何抗生素、化学激素等，无残留、无毒副作用，安全性高，为绿色环保型制剂；2）经批量试验证明：本发明药物可治疗猪链球菌和猪瘟混合感染，且治愈率高达90%，副作用小，可替代同类化药，可防治猪链球菌和猪瘟混合感染，且肉质无毒害。

本发明治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的纯中药制剂，商品名为“球瘟克注射液”。使用该发明药治愈率90%，效果明显。

具体实施方式

实施例1

（1）称取柴胡300g、金银花350g，并将柴胡切断，加水温浸，经水蒸气蒸馏，收集初始馏液，约800ml，馏液再重蒸馏，收集重蒸馏液约400mL，备用；

（2）将黄芩、地黄切片后，称取黄芩300g、地黄250g，并称取栀子150g和橘皮150g；然后将步骤（1）中产生的药渣及蒸馏后的水溶液与黄芩、地黄、栀子和橘皮合并，加水于60℃温浸2h后，煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，减压浓缩至约600mL，用乙醇沉淀处理三次，含醇量分别为60%、70%、80%，每次均冷藏24h以上，滤过，滤液回收乙醇后，加入上述重蒸馏液，搅匀，在105℃加热45min，放冷，于0-4℃放置24h以上，滤过，加注射用水至1000mL，用质量浓度为5%氢氧化钠溶液调节pH值至5.5—7.5，滤过，灌封，灭菌，即得。

本实施例制备的产品为棕黄色至棕红色澄明液体。

下面对本实施例所制备的产品进行鉴别和有效成分测定。

一、鉴别

（1）取本品2mL，置水浴上蒸干，加甲醇2mL使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—丙酮—甲酸（5：4：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝溶液，吹干，置紫外光灯（365nm）检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（《中药注射剂学》）

（2）取本品10mL，置水浴上蒸干残渣加85%乙醇5mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加85%乙醇制成每1mL含0.1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述溶液1μl，点于同一聚酰胺薄膜上，以36%醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（见《中药注射剂学》）

测得本实施例pH值为5.5-7.5。

二、含量测定

（1）绿原酸照高效液相色谱法（《中药注射剂学》）测定

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—水—冰醋酸（20：80：1）为流动相，检测波长为324nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000。

对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加水制成每1mL含0.04mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取本品3mL，置50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液10μL，供试品溶液10-20μL注入液相色谱仪，测定，即得。本品每支10mL含金银花以绿原酸（C16H18O9）不得少于.3.0mg。

（2）黄芩苷照高效液相色谱法（《中药注射剂学》）测定

系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇—冰醋酸—水（48：1：52）（体积比）为流动相，检测波长276nm。理论板数按黄芩苷峰计算，不低于1000。

对照品溶液的制备：精密称取黄芩对照品，加50%甲醇制成1mL含0.2mg的溶液。

供试品溶液的制备：取本品1mL，置50mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。测定法精密吸取供试品溶液与对照品溶液8μl，分别注入液相色谱仪，分别注入液相色谱仪，分别量取峰面积，外标计算含量，即得。

本品含黄芩苷(C21H18O11)每mL不得少于3.0mg。

本实施产品功效：清热解毒，泻火燥湿，抗病毒、抗细菌、增强机体免疫功能，促进康复、防止继发感染其他疾病,主要用于抑制和抵抗由链球菌病毒和猪瘟病毒引起的高烧不退、精神不振、食欲减退、身体出血等病。

本实施例的用法与用量：肌注一次量：猪按每千克体重0.05—0.1mL，一日2次，连用3天。

本实施例10mL/支，每mL含原生药1.5g。贮藏方法：密封，避光，置阴凉处。

本实施例产品与其它抗生素类药物在治疗猪链球菌和猪瘟混合感染的的试验比对：

1）本实施例产品按每千克体重0.05-0.1mL，连续肌注3天；

2）氨苄青毒素组：每千克体重使用10-20mg，连续肌注5天；

3）磺胺间甲氧嘧啶钠组：每千克体重使用30-40mg，连续肌注5天；

4）阿莫西林组：每千克体重使用8-14mg，连续肌注5天；

5）对照组：不使用任何药物，按照与其他组相同的方法饲养管理。

试验期间：试验用阳性猪统一饲养管理。

判定标准：临床症状消失，饮食恢复正常。

治疗效果比较：

表1

分组试验数治愈数显效数无效死亡治愈率实施例1产品32552931324090.05%实施例2产品938310089.2%实施例3产品867610088.4%实施例4产品1069412088.7%氨苄青霉素组21182185.71磺胺间甲氧嘧啶钠组20162280.00%阿莫西林组23182378.26%对照组611417%

临床实验症明：本实施例产品的实验效果明显优于其他药品，可以替代其他同类药品，且毒副作用少，肉无商检之忧，有利于提高国民素质，有利于畜牧业健康发展。

实施例2

与实施例1不同的是：金银花200g、黄芩150g、柴胡450g、地黄100g、栀子100g和橘皮100g。

水蒸馏醇沉淀后，滤过，滤液回收乙醇后，加入上述重蒸馏液，搅匀，然后采用常规的冷冻干燥的方法将其制成干粉注射制剂。便于存贮和运输。

参照实施例1的方法进行对照试验，结果参见表1。从表1可以看出，本实施例制备的产品实验效果明显优于其他药品，可以替代其他同类药品，且毒副作用少，肉无商检之忧，有利于提高国民素质，有利于畜牧业健康发展。

实施例3

与实施例1不同的是：金银花250g、黄芩225g、柴胡75g、地黄200g、栀子125g和橘皮75g。

参照实施例1的方法进行对照试验，结果参见表1。

从表1可以看出，本实施例制备的产品实验效果明显优于其他药品，可以替代其他同类药品，且毒副作用少，肉无商检之忧，有利于提高国民素质，有利于畜牧业健康发展。

实施例4

与实施例1不同的是：金银花400份、黄芩200份、柴胡250份、地黄200份、栀子200g和橘皮250g。

从表1可以看出，本实施例制备的产品实验效果明显优于其他药品，可以替代其他同类药品，且毒副作用少，肉无商检之忧，有利于提高国民素质，有利于畜牧业健康发展。

综上，在当今以回归自然和以生命科学为中心的时代，一些发达国家提出从化学合成物中的方向转向在天然中草药寻找治疗的药物。本发明经过多年临床试验，用纯中药提取有效成分的方剂，多次小批量示范试验，结果表明：疗效显著、标本兼治、安全、无毒副作用，无残留，肉质无商检之忧，深受广大养殖户青睐，有利于提高国民身体素质，为广大养殖企业保驾护航。

本发明的创新点：

1、根据祖国传统中医学理论，结合现代中药学等知识，合理配伍协作增效，组建方剂及确定最佳剂型；

2、根据致病病原，直接选择药物，从天然物中提取活性抗猪链球菌和猪瘟混合感染物质，针对性强；

3、根据临床症状，从分子生物学水平调节机体相关免疫活性细胞和细胞因子的动态变化，对该疾病的治疗基本机理周密，效果显著；

4、通过对药物代谢动力学的研究，选定了最适合机体吸收的剂型，为针对型的最佳治疗途径和治疗方法；

5、本品为纯中药制剂，不含任何抗生素，化学激素等，无残留无毒副作用，安全性高，为绿色环保型制剂。