肝纤维化补硒（肝纤维化补硒有用么）

【关键词】肝纤维化肝纤维化是各种病因所致的慢性肝病的共同病理过程，是肝硬化的必经阶段。其病理特征表现为汇管区及肝小叶内大量纤维组织异常增生沉淀，导致肝脏结构变形，从而引起或进一步加重肝功能损害。研究发现，肝纤维化继续发展有25%～40%最终发展为肝硬化。肝纤维化发生的机制极为复杂，主要表现为肝细胞外基质（ECM）的过度增多和异常沉积，这也是肝脏对慢性损伤的一种反应。肝纤维化能否逆转一直是一个有争议的问题，近年来，随着分子生物学与肝细胞分离技术的发展，肝纤维化发展的机制已被部分阐明,目前认为肝纤维化是一种可逆性病变［1］,若在肝纤维化时期积极治疗，其预后将大大改观。但目前国内外尚缺乏理想的抗肝脏纤维化的药物，临床治疗尚处于探索阶段，而动物实验研究能为临床提供实践和理论依据，因此实验性抗肝纤维化的研究亦显得格外重要。硒是生命活动不可缺少的微量元素之一，它是构成谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的重要部分，催化还原型谷胱甘肽（GSH）变成氧化型谷胱甘肽（GSSG），使有毒的过氧化物变成无毒的羟基化合物。同时，硒还与过氧化氢酶、超氧化物歧化酶（SOD）、维生素E、维生素C、类胡萝卜素等一起参加脂质氧化酶通路，主要功能是清除各种氧自由基（例如过氧化氢、有机过氧化氢、超氧化物以及羟自由基等），从而对人体正常生理功能起着关键性作用，同时对肝纤维化的预防和治疗也起到一定的作用。

已有很多动物实验的证据表明，适量硒具有抵抗自由基对肝脏的损伤作用，能够防治肝纤维化，而且随着科技发展，从动物实验中获得的硒防治肝纤维化的证据也越来越多。本文就近年来硒及其硒的化合物和生物转化物对实验性大鼠肝纤维化的干预作用进行综述。近年来出现了多种硒化合物除了无机硒以外，近年来产生了多种有机硒，有机硒具有更好的生物学效应和生物可利用性。通过有机硒化合物富硒螺旋藻和无机硒对大鼠抗肝纤维化作用比较研究结果表明［2］，饲富硒螺旋藻（Se-SP）的实验性肝纤维化大鼠（Se-SP组）的血清谷丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬门氨酸氨基转移酶（AST）、总蛋白,白蛋白、白蛋白/球蛋白之比（A/G）均显著优于饲亚硒酸钠大鼠（Se组）；肝组织病理学显示：肝组织中胶原相对含量Se-SP组显著低于Se肝纤维化分期为I期、期和期的大鼠在二组中分别出现9、3、0只；血清硒、GSH-Px、SOD也是前者高于后者，而血清透明质酸（HA）和过氧化产物丙二醛则是Se-SP组显著低于Se组。Se-SP拮抗大鼠实验性肝纤维化的机制主要是富含抗氧化天然活性物质，如藻蓝素、Y-亚麻酸、藻多糖等的螺旋藻，经过硒强化培养后，获得具促进硒酶活力生物活性硒源。

机体在得到硒元素的同时还得到螺旋藻本身富含有的大量优质蛋白及其他有效成分，增强机体抗氧化能力和肝功能贮备，促进肝细胞修复等生物活性。由于生物转化的有机硒比无机硒生物易吸收而毒性低，特别是富含天然抗氧化活性物质和蛋白质的植物如大蒜、茶、微藻、大米、麦等，还有含硒食品富硒蛋等。通过种植和培养生产富硒产品是可行的。硒酵母、硒蛋白、葡萄糖酸硒、硒代半胱氨酸、硒酸脂多糖、灵芝硒多糖、大蒜硒多糖及从富硒箬叶中也提取到硒多糖的成分，用硒粉和角叉菜胶也合成一种新的有机硒多糖-硒化角叉菜胶等都是机体补充硒元素良好来源，它们均表现出明显优于多糖、蛋白质或亚硒酸钠的生物活性和生物利用度。近年来，有国外学者对纳米红色元素硒（nanoredelementalselenium，Nse）对肝损伤的保护作用做了大量的研究［3，4］，亚硒酸钠、二氧化硒等硒化合物虽有较高生物活性，但其毒性也较大，零价元素硒因其尺度大，不溶于水，故无生物活性和毒性，Nse即为零价元素硒。Nse以蛋白质为核，以红色元素硒为膜和以蛋白质为分散剂的新型纳米粒子。它形成以蛋白质和Nse组成的胶体溶液，跨越性的体现出高生物利用价值。通过Nse对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤的保护作用研究，及与葡萄糖醛酸内酯（glucurolactone，Glu）联用对大鼠肝纤维化形成过程的干预作用研究，显示了Nse具有更好的生物利用性和突出的低急性毒性，是一种具有应用价值的硒形态［5］。

在国内郑青山等［6］为降低硒用量将Nse与Glu联用，观察对大鼠肝纤维化形成过程的干预作用。结果显示急性肝损伤阶段的短期用药（3wk），宜单用大剂量Nse（200μg/kg）即可；两药联合长期使用（6wk），在小剂量时（Nse100μg/kgGlu50mg/kg）对大鼠实验性肝纤维化已呈现明显的防治作用，联用NseGlu作用强于单用Nse，优化的组合剂量为Nse100μg/kg+Glu60mg/kg（ig），亦证实了Nse确实是一种高效低毒的新的硒形式。硒干预实验性大鼠肝纤维化的效果肝脏内细胞、ECM及介质是肝纤维化显型表达的三个基本成分，它们之间的相互作用、信号传递及正负反馈调节是迄今对肝纤维化认识的最重要概念。目前采取的抗肝纤维化总体对策包括保护肝细胞、抗氧自由基、促进肝细胞再生、抵制肝脏炎症、免疫调整、抵制肝星状细胞（HSC）活化及增殖、促进HSC凋亡、调整ECM的合成及降解等方面。2．1硒与血清肝功能变化在大鼠肝纤维化造模时，血清肝功能是敏感的指标，在第一次注射CCl4后6h就会出现ALT、AST升高迹象［7］。但在饲料中添加适量硒（Se）（0.2mg／kg）和维生素E（VE）（250mg／kg）能显著降低血清中ALT、AST水平［8］。

在另一个实验中Se组补充亚硒酸钠10.8μSe-SP组补100mgSe-SP（推算补Se10.8μg）。与模型组相比，Se-SP组对大鼠血清ALT和AST酶活性及AST／ALT比值显著降低，血清总蛋白、白蛋白和A/G比值则明显升高，Se组肝功能指标恢复程度比Se-SP与Glu联用,在以CCl4制造大鼠肝纤维化模型3周时,ALT的下降率根据各补硒量（10～200μkg）的增大而升高；其中“Nse100μg/kg+Glu60mg/kg（ig）”组在造模ALT,与模型组继续升高的ALT相比差异有显著性（P0.01）,呈现出防治肝纤维化的作用［6］。2．2硒与血清肝纤维化指标变化急性或慢性肝损害时，损伤肝细胞及邻近内皮细胞，首先启动炎性细胞、枯否细胞，导致HSC激活、增生、转化和分裂，合成大量胶原蛋白、蛋白多糖及糖蛋白等ECM。因此HSC和ECM等均成为肝纤维化的标志物。通过检测HSC亡状况来了解用50％CCl4制备大鼠肝纤维化模型最后一次注射后3、7、14、28天（恢复期）的肝组织状况，结果在恢复期各时间点，病理对照组和抗氧化干预组（饲料中含适量VESe）激活的HSC数量呈逐步下降趋势，同时，从恢复期第天开始，HSC凋亡细胞数以及肝组织内的胶原量亦同步下降；在同一时间点，干预组激活的HSC数量低于病理对照组，而HSC凋亡数和凋亡率均高于病理对照组［9］。

在大鼠肝纤维化造模时和成模时，应用硒预防可使 肝组织胶原蛋白含量的指标-羟脯氨酸明显低于模型组（P0.01）［8，10］，说明要预防肝 纤维化的发生，首先要防止肝细胞损伤。补硒对大鼠肝纤维化血清标志物透明质酸（HA）［2， 11～13］和层粘连蛋白（LN）［13，14］有显著下降作用，对前胶原蛋白（PC）也有一定 下降作用［6］。 2．3 硒在大鼠肝纤维化模型中的抗氧化作用 在江苏省启东市食用硒盐的自然人群中, 其血硒和血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量显著高于不摄取硒盐者［15］。在肝纤维化 大鼠模型中,饲硒模型鼠肝组织和血清中的硒含量与未饲硒模型鼠相比有明显上升［8］,但与 未饲硒的非模型的正常大鼠相比,则无显著上升迹象［8，10，16］,提示在肝细胞损伤情况下 机体对抗氧化剂硒的所需量比正常情况下的需求量要大。 含硒酶是体内内源性抗氧化保护系统（AODS） 的重要成员之一，AODS 能拮抗氧反应基 防止氧化损伤的积累，避免氧化应激状态的出现。硒是体内含硒酶的重要组分，体内 硒的营养状态可直接影响到体内重要的含硒酶 GSH-Px 和磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 （PHG-Px）的活性及合成。

现在的研究已证实，体内硒营养状态与体内含硒酶的活性密切相 关，适量的硒营养能够有助于提高体内含硒酶类的活性，从而提高机体的抗氧化能力，拮抗 自由基对机体的损伤。饲硒后大鼠血清中 GSH-Px 随之上升［8，12］。硫氧还蛋白还原酶 （thioredoxin reduce-tases,TR） 活性也显著升高。与GSH-Px 一样 TR 在细胞抗氧化及增 殖、分化调节中也起重要作用［12］。 SOD 对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，故 SOD 活力的高低间接反映了机 体清除氧自由基的能力。饲硒大鼠SOD 水平在各个实验中略有不同:李峰等报道硒干预组大鼠 肝组织 SOD 活性显著高于模型组（50% CCl4 （P0.05）,与对照组之间无差别，干预组血清SOD 活性也高于模型组（P0.01）但低于对照组（P0.05）［8］；李琳等也 报道喂硒大鼠血清 SOD 活性明显高于染毒组（40% CCl4 制模）（P0.05），但低于对照组 ［11］；黄峙等则报道饲富硒螺旋藻大鼠血清SOD 活性比对照组高（P0.05）但与模型组 （3%硫代乙酰胺制模）相似［2］。这些区别可能与诱发肝纤维化的试剂和硒的形式不同所致。

丙二醛的量反映了机体内脂质过氧化的程度，可间接地反映出机体细胞受自由基攻击的 严重程度。在肝纤维化实验中，模型组大鼠肝组织和血清丙二醛含量均明显高于硒干预组 （P0.01），硒干预组肝组织和血清丙二醛含量则高于对照组［2，8，17］。 生物膜在细胞的结构和功能中起关键作用。细胞膜的流动性对于细胞维持正常的生理功 能十分重要。结合在膜上的酶及受体的活性都要受到细胞膜流动性的影响［18］。四氯化碳在 体内可使膜脂质不饱和脂肪酸发生过氧化。实验证明过氧化与膜流动性密切相关。饲硒组的 生物膜流动性显著优于模型组［10］，也证实了硒的抗氧化作用。 作者：倪正平 2．4硒使肝纤维化病理学病变减轻 对肝纤维化实验模型大鼠的肝细胞描述主要有肝细胞 肿胀、变性（脂肪性变、水样变）坏死、炎症改变、排列紊乱等；而硒干预大鼠的肝细胞病 变均明显减轻［6，8～11，16，17］。 根据五个实验报道，共有 48 只对照用大鼠肝组织均未出现肝纤维化；70 只饲硒模型鼠 中肝纤维化呈、、和级分别占34%、40%、 11%和0；而43 和级分别占7%、19%、40%和35%［2，8，13，14，16］。说明适量补硒能够拮抗肝坏死的发生或减轻其程度，因而能阻止肝纤维化进展。

2.5 硒影响细胞免疫功能 人单核细胞（PBMC）经硒预作用6h 后,可明显对抗叔丁基过 氧化氢诱导的脂质过氧气化损伤,仍保持较高的白细胞介素-2（IL-2）分泌和白细胞介素-2 受体（IL-2R）表达能力,与未加硒的PBMC 比较差异有显著性（P0.05,P0.01）；而硒 对正常人PBMC 分泌IL-2 和表达IL-2R 则未见显著影响［19］。 硒预防肝纤维化作用大于治疗作用在中药抗纤I 号和软肝胶囊加硒治疗已经成模的大鼠肝硬化时,大鼠胸腺组织 CD4、CD4 ／CD8［13，20］；胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能、脾指数、血清循环免疫复合物、肝组织TGF- mRNA的表达量［20］等各种指标仅略优于未加硒大鼠，两者差异无显著性，说明补硒对