癌症科学补硒（癌症科学补硒）

专利名称：：硒代硫酸钠在制备临床补硒和治疗癌症药物中的应用及快速制备方法

技术领域：

：本发明涉及硒代硫酸钠的新用途，确切地说是硒代硫酸钠在补充硒和改善癌症化疗药物治疗效果中的应用，以及硒代硫酸钠的快速制备方法。

背景技术：

：硒是人体必需的微量元素。硒半胱氨酸是谷胱甘肽过氧化物酶、磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶、硫氧还蛋白还原酶、蛋氨酸亚砜还原酶、碘甲腺原氯酸脱碘酶活性中心，参与机体抗氧化和能量代谢。此外，高剂量硒有抑制癌细胞生长、杀伤癌细胞作用。已知高危病人在重症病房监护期通过注射补充高剂量亚硒酸钠，其生存质量明显改善，死亡率明显下降。由于亚硒酸钠是一种具有很强毒性的硒形式，硒的有益剂量与有害剂量范围很窄，因此临床上需要一种具有和高剂量的亚硒酸钠具有相同生物活性的但毒性更低的硒形式来替换它。化疗具有导致病人的白细胞下降、腹泻、呕吐、水肿等副作用，甚至会威胁到病人自身生命，这些副作用严重地限制了化疗药的用量和治疗效果。已有的研究表明，亚硒酸钠能够降低顺铂毒性，但不影响其疗效，从而允许高剂量顺铂的应用，进而增强顺铂抗肿瘤作用。然而，这些研究使用的亚硒酸钠剂量都处于毒性水平(0.5-2mgSe/kg)，长期使用会影响到它和化学药物合并治疗的效果。由于硒的有益与有毒剂量之间范围十分窄，因此在药理剂量上补充硒以及在和化学药物合并治疗癌症的应用上，采用自身的毒性较低的硒化合物才能保证它们的安全实施。硒代硫酸钠(sodiumselenosulfate)是一种不稳定的无机硒化合物，所以无市售产品。它被广泛用于含硒纳米材料的制备，如用硒代硫酸钠制备纳米硒化铜、硒化镉、硒化铅等。硒代硫酸钠的制备通常是采用零价元素硒粉末与亚硫酸钠混合，摩尔质量比(硒/硫)达1:3至1:6范围，在80至100。C回流2至4小时，亚硫酸钠过量对于新生的硒代硫酸钠的稳定时间十分重要，亚硫酸钠愈多，稳定时间愈久，一般是将新制备的硒代硫酸钠很快用于含硒纳米材料的制备。硒代硫酸钠是一种含硒化合物，关于硒代硫酸钠的补硒效应以及与硒相关的生物学功能未见任何报道。

发明内容本发明针对硒毒性的现实问题，试图寻找能够替代亚硒酸钠的安全性更高的硒化合物。本发明旨在提供硒代硫酸钠的新用途，即硒代硫酸钠在补充硒和改善癌症化疗药物治疗效果中的应用。本发明的另一目的是提供硒代硫酸钠的快速制备方法。本发明证明在药理剂量硒代硫酸钠与亚硒酸钠补充硒能力相同，见图1两者结构式，有趣的是硒代硫酸钠对正常组织的毒性显著低于亚硒酸钠，而对癌细胞的毒性又显著高于亚硒酸钠，这些特点显示使用硒代硫酸钠的合理性。本发明证明使用硒代硫酸钠，在药理剂量它产生与亚硒酸钠同样有效的补硒效果，但毒性明显低于亚硒酸钠；硒代硫酸钠能有效降低化疗药的毒性，大幅提高化疗药的治愈率，这些性质显示出利用它的必要性。但是，临床上长期使用硒代硫酸钠补充硒和改善化疗药的治疗效果，面临着硒代硫酸钠不稳定的问题，这就需要它在临用前制备。而已知的制备方法是将零价元素硒粉与亚硫酸钠混合，在高温回流几小时，显然这不易于在临床上推广使用。为方便获得硒代硫酸钠，本发明采用亚硒酸钠、还原剂与亚硫酸钠三者按一定比例的混合，能快速形成硒代硫酸钠。具体的快速制备方法如下-将亚硒酸钠、还原剂与亚硫酸钠三者按一定比例的混合。一种操作方法是亚硒酸钠被含巯基的还原剂还原。

还原剂可以是谷胱甘肽、或半胱氨酸、或N-乙酰半胱氨酸、或硫辛酸等，它们与亚硒酸钠混合以后形成RS-Se-SR，在酸性下稳定，在中性与碱性下转化为零价硒。在亚硒酸钠与还原剂的混合物中加入亚硫酸钠，亚硫酸钠的弱碱性作用使RS-Se-SR产生零价硒，亚硫酸钠与这些新生的零价硒迅速反应瞬间形成硒代硫酸钠。另一种操作方法是亚硒酸钠被其他类型的还原剂还原。还原剂可以是抗坏血酸，二氧化硫等不含巯基的物质，它们与亚硒酸钠混合以后形成零价元素硒。在亚硒酸钠与还原剂的混合物中加入亚硫酸钠，亚硫酸钠与零价元素硒反应快速形成硒代硫酸钠。这些手段可以保证简易快捷获取新鲜的硒代硫酸钠，使临床上利用硒代硫酸钠补充硒或改善化疗药治疗效果易于实施。图1为硒代硫酸钠和亚硒酸钠的化学结构式，图2为小鼠平均体重图，图3为小鼠生存曲线图，图4为血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)变化图，图5为亚硒酸钠作用后的肝组织切片图，图6为硒代硫酸钠作用后的肝组织切片图，图7为硒对HepG2癌细胞的杀伤(A)和生长抑制作用(B)图，图8为硒对GaGo2癌细胞的杀伤(A)和生长抑制作用(B)图，图’9为不同尺寸元素硒的电镜观察图。

具体实施例方式下面结合附图，通过实施例对本发明作进一步地描述。实施例l:药理剂量硒代硫酸钠与亚硒酸钠补充硒的效果比较已报道高剂量亚硒酸钠能改善重症疾病病人的症状，提高化疗药治疗癌症的疗效。硒代硫酸钠在这些药理剂量上与亚硒酸钠补硒效果是否有区别尚无研究。在本例中，使用缺硒小鼠，腹腔注射亚硒酸钠和硒代硫酸钠0.5和lmgSe/kg，连续一周。测定酶活力和硒，以比较两者补充硒的差别。实验动物缺硒昆明小鼠，雄性，体重20-23克，购于安徽医科大学实验动物中心。给药方案取35只小鼠，随机分为5组，每组7只。对照组注射生理盐水，其余组分别注射不同剂量(0.5和lmgSe/kg)的亚硒酸钠和硒代硫酸钠，连续7天。生化指标测定未次补硒24小时后眼静脉取血，离心取血清，测定其中的硒态和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力；同时取肝和肾，-30°